超高效液相色谱-串联质谱法测定水稻叶片中甲硫腺苷含量

摘要

建立了一种水稻叶片中甲硫腺苷的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)定量检测方法,为水稻及其它植物生长发育的调控研究提供指导。水稻叶片粉碎后经70%的甲醇溶液2次提取,萃取液浓缩后用于上样分析。甲硫腺苷通过BEH C18(2. 1×100mm,1. 7μm)色谱柱进行梯度分离,0. 01%的乙酸铵(W/V)溶液-乙腈做为流动相。质谱检测采用正离子模式,扫描方式为多反应监测模式(MRM),分别选择2个特征离子通道(m/z:298. 31→136. 13和m/z:298. 31→61. 06)用于甲硫腺苷的定性和定量检测,甲硫腺苷的保留时间为1. 30min,空白样品无干扰影响含量测定。结果:甲硫腺苷在为50～1600ng/L,1～20μg/kg范围内线性良好(R2为0. 9992),方法检测限为0. 03ng/g,定量限为0. 09ng/g。低、中、高3个浓度下的平均介质效应分别为85. 3%、89. 2%、95. 6%,精密度小于5. 32%。该方法简便、快速、定量检测可靠、灵敏度高,能够满足植物中甲硫腺苷研究中大规模样品的快速分析。