人胚骨髓基质细胞饲养层对人胚胎生殖细胞生长的作用

摘要

目的:研究人胚原代骨髓基质细胞(BMSC)饲养层对人胚胎生殖细胞(hEGC)生长的支持作用.方法:以非意愿妊娠流产胎儿股骨为材料制备BMSC饲养层;同时取胎儿组织分离培养人成纤维细胞,以成纤维细胞培养液上清制备条件培养液(CM).另取13.5 d胎鼠制备原代小鼠胎儿成纤维细胞(PMEF)饲养层.分组培养人原始生殖细胞:A组(PMEF饲养层)、B组(BMSC饲养层)、C组(CM)、D组(BMSC饲养层+CM),观察不同条件下hEGC生长增殖行为.结果:D组与A组均有利于支持人胚胎生殖细胞的体外生长,并保持其不分化的状态和多分化的潜能,两组比较无明显差异.单用B组可支持人胚胎生殖细胞的体外生长,但效率低于上述两组.单用条件培养液不能获得贴壁生殖细胞克隆.结论:BMSC饲养层+CM可支持hEGC的体外培养,且无异源性蛋白的污染,更有利于临床应用.