同源框基因HOXAll顺式作用元件具有启动子活性及孕激素应答元件功能

摘要

目的:探讨HOXA11基因顺式作用元件是否存在启动子及孕激素应答元件序列.方法:采用PCR技术以人基因组DNA为模板.扩增含HOXA11顺式作用元件序列的DNA片段;将扩增片段与无启动子的强化绿色荧光蛋白报告基因载体pEGFP-1多克隆位点连接,构建HOXA11基因顺式作用元件的表达载体pEGFP-HOXA11;用脂质体法将表达载体转染到Ishikawa细胞中,在荧光显微镜下观察重组HOXA11基因顺式作用元件的启动活性,以及转染细胞经孕酮处理后细胞内绿色荧光蛋白表达水平的变化.结果:成功地将HOXA11基因顺式作用元件克隆到报告基因载体pEGFP-1中,酶切和PCR鉴定以及DNA序列分析无误;转染pEGFP-HOXA11,表达载体的Ishikawa细胞能表达发出绿色荧光的报告基因蛋白,而且经孕酮处理后绿色荧光强度明显增强.结论:HOXA11基因顺式作用元件具有启动子活性和孕激素应答元件功能.