龙胆泻肝汤抑制葡萄膜炎大鼠Notch信号通路活化的作用

摘要

目的 探讨龙胆泻肝汤(Longdan Xiegan Decoction,LXD)对实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis,EAU)大鼠Notch信号通路活化的抑制作用及其对辅助性T细胞17(T helper 17,Th17)和调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)表达水平的影响.方法 随机将雌性Lewis大鼠分为正常对照(NC)组、EAU模型组、LXD干预组.EAU模型组和LXD干预组大鼠诱导EAU,免疫后LXD干预组大鼠每天给予LXD灌胃处理,EAU模型组大鼠给予等量生理盐水灌胃.免疫后12d观察大鼠眼部炎症表现,取三组大鼠眼球进行病理切片,观察病理学变化;实时荧光定量PCR(quantitative polymerase chain reaction,QT-PCR)和酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测免疫后12 d三组大鼠脾脏、淋巴结及眼组织中Notch1、DLL4、白细胞介素10(interleukin 10,IL-10)和IL-17 mRNA及蛋白的表达;流式细胞仪检测三组大鼠各组织中Th17、Treg细胞的表达.结果 病理检查结果表明,LXD对EAU大鼠眼部组织结构有明显的保护作用.QT-PCR和ELISA检测结果发现,与NC组相比,LXD干预组大鼠脾脏、淋巴结和眼组织中Notch1、DLL4、IL-10、IL-17mRNA和蛋白表达水平均升高,但除IL-10外,其他明显低于EAU模型组(均为P＜0.05);流式细胞仪检测结果发现,EAU模型组大鼠的各组织中Th17/Treg比例均高于NC组,经LXD干预后,Th17细胞表达水平下降,Treg表达水平升高,两者比例趋向平衡.结论 LXD可有效降低EAU大鼠脾脏、淋巴结、眼组织中Notch1、DLL4、IL-10和IL-17 mRNA和蛋白的表达水平,改善Th17/Treg细胞比例的平衡,从而有效减轻EAU大鼠的眼部炎症,保护眼部组织结构,调节全身及眼部的免疫状态.