DLL4

摘要： 目的探讨miR-30b-5p对实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)大鼠Notch信号通路活化的调控机制及治疗作用。方法通过Target Scan(http//www.targetscan.org/)对Notch1和Dll4基因与miR-30b的关系进行生物信息学预测。将雌性Lewis大鼠随机分为对照组、EAU组、miR-30b-5p组和miR-30b-5p空载体(miR-30b-5p-N)组。EAU组、miR-30b-5p组和miR-30b-5p-N组大鼠首先诱导EAU模型,miR-30b-5p组和miR-30b-5p-N组大鼠分别采用携带miR-30b-5p和miR-30b-5p-N的慢病毒于EAU大鼠脾脏进行注射干预处理,EAU组大鼠于同一部位注射相同体积的生理盐水。处理后12 d,实时荧光定量PCR检测4组大鼠脾脏、淋巴结和眼组织中Notch1和Dll4 mRNA的表达;免疫组织化学检测4组大鼠脾脏、淋巴结及眼组织中Notch1和Dll4蛋白的表达,分析miR-30b-5p对葡萄膜炎大鼠Notch信号通路的调控作用。结果生物信息学预测分析结果表明,Notch信号通路上Notch1和Dll4基因均为miR-30b调控的靶基因。免疫后12 d,相比于对照组,EAU组、miR-30b-5p组和miR-30b-5p-N组大鼠脾脏、淋巴结和眼组织中Notch1和Dll4 mRNA水平均升高(均为P<0.05);经miR-30b-5p干预治疗后,miR-30b-5p组脾脏、淋巴结和眼组织中Notch1和Dll4 mRNA表达均显著降低(均为P<0.05)。免疫组织化学检测结果显示,免疫后12 d,EAU组、miR-30b-5p组和miR-30b-5p-N组大鼠脾脏、淋巴结和眼组织中Notch1和Dll4蛋白表达均上调(均为P<0.05);miR-30b-5p干预治疗后,脾脏、淋巴结和眼组织中Notch1和Dll4蛋白表达均显著下调(均为P<0.05)。结论miR-30b-5p可明显下调EAU大鼠各组织中Notch1和Dll4等Notch信号通路相关分子的表达进而抑制Notch信号通路活化,从而达到治疗葡萄膜炎的作用。

摘要： 目的 探讨低分子肝素对子痫前期(preeclampsia,PE)患者胎盘组织中血管内皮细胞的Notch信号通路配体Delta样配体4(Delta-like ligand 4,DLL4)表达的影响,及其对内皮细胞损伤的作用及相关机制.方法 选取2018年3月至2019年4月在海南医学院第二附属医院妇产科住院分娩的早发型重度PE患者60例,按随机数字表法将其分为PE组(单用硫酸镁)与低分子肝素组(联合使用硫酸镁与低分子肝素),各30例.选取同期正常妊娠剖宫产妇女30例为对照组.免疫组织化学法观察对比3组产妇胎盘组织中DLL4的表达水平;ELISA检测3组孕产妇外周血中内皮损伤相关细胞因子内皮素-1(endothelian-1,ET-1)、可溶性血管细胞黏附分子-1(soluble vascular cell adhesion molecule-1,sVCAM-1)的表达;体外培养脐静脉内皮细胞,预先应用低分子肝素进行干预,再应用PE患者血清进行刺激,TUNEL染色,内皮细胞通透性检测观察低分子肝素对PE血清诱导的内皮细胞凋亡,内皮细胞完整性的影响;Western blot检测低分子肝素对PE血清诱导的内皮细胞中凋亡蛋白Bcl-2、Bax、Cleaved caspase-3表达的影响,并使用Notch信号通路阻滞剂MK-0752进行干预,观察低分子肝素是否通过Notch/DLL4信号通路抑制PE血清诱导的内皮细胞凋亡.结果 DLL4主要表达于胎盘组织的血管内皮细胞中,且与对照组(63.5％)相比,PE组及低分子肝素组的胎盘组织中DLL4的表达阳性率(分别为14.7％、36.9％)均明显更低,而低分子肝素组较PE组中DLL4的表达明显更高,差异均有统计学意义(P＜0.05);与对照组相比,PE组及低分子肝素组产妇血清中ET-1、sVCAM-1表达水平明显更高;与PE组相比,低分子肝素组产妇血清中上述细胞因子的表达水平明显更低,差异均有统计学意义(P＜0.05).预先使用低分子肝素处理可显著抑制PE血清诱导的内皮细胞凋亡,并改善PE血清对其的通透性影响,从而保护内皮细胞的完整性.Western blot结果表明,低分子肝素能够通过促进抗凋亡相关蛋白Bcl-2的表达,抑制促凋亡蛋白Bax、Cleaved caspase-3的表达来改善PE血清对内皮细胞损伤,而使用Notch信号通路抑制剂MK-0752能显著逆转低分子肝素对凋亡相关蛋白的上述影响.结论 联合使用低分子肝素能够通过促进胎盘组织内皮细胞中DLL4的表达,其可能通过Notch/DLL4信号通路抑制内皮细胞的凋亡,从而保护内皮细胞的完整性,改善PE的临床预后.

摘要： 目的 观察麦粒灸对薄型子宫内膜大鼠血管生成的影响,探讨其可能的作用机制.方法 30只SPF级成年雌性SD大鼠随机分为对照组、模型组、麦粒灸组,每组10只.除对照组外,其余2组大鼠采用95％乙醇宫腔注射法于动情期制备薄型子宫内膜模型.麦粒灸组造模后次日麦粒灸"关元""子宫",每穴7壮,1次/d,对照组和模型组大鼠每日麻醉后固定,连续3个动情周期(约15d).干预结束后,HE染色观察大鼠子宫内膜形态,免疫组化检测大鼠子宫内膜组织血管内皮生长因子(VEGF)和血管生成素-2(Ang-2)表达,Western blot检测大鼠子宫内膜组织DLL4和Notch1蛋白表达,RT-qPCR检测大鼠子宫内膜组织VEGF、Ang-2、DLL4和Notch1 mRNA表达.结果 与对照组比较,模型组大鼠子宫内膜明显变薄,腺体、血管数目明显减少,子宫内膜组织VEGF、Ang-2、DLL4和Notch1蛋白及mRNA表达明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.01);与模型组比较,麦粒灸组大鼠子宫内膜厚度明显增加,腺体、血管数目明显增多,子宫内膜组织VEGF、Ang-2、DLL4和Notch1蛋白及mRNA水平明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论 麦粒灸可改善子宫内膜厚度,促进子宫内膜血管生成,达到修复作用,其机制与促进薄型子宫内膜大鼠子宫内膜组织VEGF、Ang-2表达,上调Notch信号通路相关分子DLL4、Notch1水平有关.

摘要： 目的 探讨龙胆泻肝汤(Longdan Xiegan Decoction,LXD)对实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis,EAU)大鼠Notch信号通路活化的抑制作用及其对辅助性T细胞17(T helper 17,Th17)和调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)表达水平的影响.方法 随机将雌性Lewis大鼠分为正常对照(NC)组、EAU模型组、LXD干预组.EAU模型组和LXD干预组大鼠诱导EAU,免疫后LXD干预组大鼠每天给予LXD灌胃处理,EAU模型组大鼠给予等量生理盐水灌胃.免疫后12d观察大鼠眼部炎症表现,取三组大鼠眼球进行病理切片,观察病理学变化;实时荧光定量PCR(quantitative polymerase chain reaction,QT-PCR)和酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测免疫后12 d三组大鼠脾脏、淋巴结及眼组织中Notch1、DLL4、白细胞介素10(interleukin 10,IL-10)和IL-17 mRNA及蛋白的表达;流式细胞仪检测三组大鼠各组织中Th17、Treg细胞的表达.结果 病理检查结果表明,LXD对EAU大鼠眼部组织结构有明显的保护作用.QT-PCR和ELISA检测结果发现,与NC组相比,LXD干预组大鼠脾脏、淋巴结和眼组织中Notch1、DLL4、IL-10、IL-17mRNA和蛋白表达水平均升高,但除IL-10外,其他明显低于EAU模型组(均为P＜0.05);流式细胞仪检测结果发现,EAU模型组大鼠的各组织中Th17/Treg比例均高于NC组,经LXD干预后,Th17细胞表达水平下降,Treg表达水平升高,两者比例趋向平衡.结论 LXD可有效降低EAU大鼠脾脏、淋巴结、眼组织中Notch1、DLL4、IL-10和IL-17 mRNA和蛋白的表达水平,改善Th17/Treg细胞比例的平衡,从而有效减轻EAU大鼠的眼部炎症,保护眼部组织结构,调节全身及眼部的免疫状态.

摘要： 目的 探讨rno-miR-30b-5p对Notch1和Dll4基因表达的调控作用及其在实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis,EAU)中的表达变化.方法 应用双荧光素酶检测rno-miR-30b-5p对Notch1和Dll4基因表达的调控作用.6～8周龄健康Lewis大鼠12只,随机分为对照组和EAU模型组,EAU模型组大鼠建立EAU模型.于免疫后12 d分离大鼠的脾脏、淋巴结和眼组织,Q-PCR检测 rno-miR-30b-5p、Notch1和Dll4基因的表达水平,ELISA检测Notch1和Dll4蛋白的表达变化;流式细胞仪检测两组大鼠脾脏和淋巴结中Th17和Treg细胞的表达水平.结果 双荧光素酶检测结果表明,Notch1和Dll4为rno-miR-30b-5p调控的靶基因.Q-PCR分析结果显示,相比于正常对照组(1.00),免疫后12 d,rno-miR-30b-5p基因在EAU模型组大鼠脾脏、淋巴结和眼组织中的相对表达水平分别为0.41 ± 0.12、0.37 ± 0.09和0.25 ± 0.07,均呈显著下调表达,而Notch1和Dll4基因呈显著上调表达,且差异均有统计学意义(均为P＜0.05).ELISA检测结果显示,免疫后12 d,EAU模型组大鼠脾脏、淋巴结 和眼组织中Notch1和Dll4蛋白的表达水平均明显高于对照组(均为P＜0.05).流式细胞仪检测结果显示,免疫后12 d,EAU模型组大鼠脾脏和淋巴结中Th17细胞因子的表达水平明显升高,而Treg细胞因子的表达水平明显降低.结论 rno-miR-30b-5p可负调控Notch1和Dll4基因的表达.在EAU模型大鼠的脾脏、淋巴结和眼组织中,rno-miR-30b-5p的下调表达可使Notch1和Dll4基因的表达水平显著升高,并使Th17／Treg比例发生紊乱,从而影响葡萄膜炎的发生发展.

摘要： 目的 探讨碳酸酐酶IX(CAIX)、DLL4在胃腺癌组织中的表达水平与胃腺癌临床病理特征、肿瘤复发间的关系.方法 采用免疫组织化学法检测83例胃腺癌及40例癌旁正常组织中CAIX、DLL4、VEGF、CD34的表达程度,回顾性分析83例胃腺癌的临床病理和预后资料.结果 胃腺癌组织中CAIX和DLL4的阳性表达率均高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P0.05);CAIX与DLL4、VEGF、CD34均存在相关性,DLL4与VEGF、CD34存在相关性.生存分析显示,CAIX、DLL4高表达与无复发生存时间缩短相关.多因素Cox回归模型分析表明,CAIX、DLL4、TNM分期是影响胃腺癌患者术后生存的危险因素.结论 CAIX和DLL4胃腺癌中高表达,可能参与胃腺癌的发生和发展,有望成为胃腺癌术后复发的预测因子.

摘要： 目的:通过构建急性心肌缺血模型,探讨心痛泰对急性心肌缺血大鼠新生血管密度、缺血心肌中Notch1、Dll4蛋白表达的影响。方法:100只SD大鼠,除假手术组10只外,其余大鼠予以结扎大鼠冠状动脉左前降支造成急性心肌缺血损伤模型,成模大鼠随机分为模型组,心痛泰低、中、高剂量组及麝香保心丸组。分别给以蒸馏水,心痛泰低、中、高剂量及麝香保心丸进行灌胃2周后,采用免疫组化法测新生微血管密度及缺血区心肌组织Notch1、Dll4蛋白的表达情况。结果:模型组大鼠的缺血心肌微血管密度、缺血心肌中的Notch1、Dll4蛋白表达均高于假手术组(P<0.05);心痛泰各剂量组及麝香保心丸组大鼠缺血心肌微血管密度、缺血心肌中的Notch1、Dll4蛋白表达均高于模型组(P<0.05)。结论:心痛泰具有保护缺血心肌的作用,这可能与其能激活Notch信号通路,上调Notch1、Dll4蛋白在缺血区的表达,促进血管新生有关。

摘要： Objective To explore the role of Notch signaling pathway in the matrix synthesis of osteoarthritis cartilage cell and its possi -ble mechanism.Methods Selected the femoral condylar cartilage of 8 patients who were admitted into our hospital and treated with knee joint replacement as the observation group,while the normal femoral condyle cartilage of one patient with above-knee amputation was selected as the control group.The specimens were given histological examination or cell isolation culture and detection.The cultured cells were divided into 4 groups,namely the normal cartilage cells,OA cartilage cells,OA cartilage cells with γ-secretase inhibitor DAPT,OA cartilage cells with recombinant human proteins Delta4.Then immunohistochemistry and Western blot were used for detecting the expression of Notch -1,Notch-3, Jagged-1,Jagged-2 and HES5 in chondrocytes in vitro.Results The expression of Notch signaling pathway and the phenotype of cartilage cells changed in the osteoarthritis.The expression of Notch-1,Jagged-1,Jagged-2 and HES5 were activated.γ-secretase inhibitor DAPT (20 μmol/L)could inhibit the expression of Notch-1,HES5,Jagged-1,and Notch-3,while it had no obvious effect on the expreesion of Jag-ged-2.Recombinant human proteins Delta 4(100 ng/μL)could promote the expression of Notch-1,Jagged-2,and HES5,and it had no obvi-ous effect on the expreesion of Jagged-1 and Notch-3.Conclusion The expression of Notch signaling pathway of cartilage cells changed in the osteoarthritis.DLL4 can activate the Notch signaling pathway and DAPT can inhibit the Notch signaling pathway.%目的 探索Notch信号通路对骨关节炎(OA)软骨细胞基质合成的影响及可能的作用机制.方法 选择2017年我院收治的8例因膝关节OA行膝关节置换患者的股骨髁软骨作为观察组,再选择1例因外伤行膝上截肢的正常股骨髁软骨作为对照组.所取的标本行组织学检测或细胞分离培养及检测.细胞培养分组按照正常软骨细胞、OA软骨细胞、OA软骨细胞+γ-分泌酶抑制剂DAPT(DAPT组)、OA软骨细胞+重组人Delta4蛋白(DLL4组).免疫组化定性分析以及Western blot蛋白质印迹技术定量分析Notch-1、Notch-3、Jagged-1、Jagged-2、HES5的表达.结果 Notch信号通路表达水平在OA中发生变化,软骨细胞表型改变,Notch-1、Jagged-1、Jagged-2、HES5表达被激活.γ-分泌酶抑制剂DAPT(20 μmol/L)干预Notch信号通路后,抑制OA软骨细胞中Noctch-1、HES5、Jagged-1、Notch-3的表达,对Jagged-2的表达作用不明显.重组人Delta4蛋白(100 ng/μL)干预Notch信号通路后,促进Notch-1、Jagged-2、HES5的表达,对Jagged-1、Notch-3作用不太明显.结论 Notch信号通路表达水平在OA中发生变化;DLL4能激活Notch信号通路,DAPT能抑制Notch信号通路.

摘要： 本发明公开了一种用于产生四相延时信号的方法及DLL电路，其通过延时锁相环电路通过捕获待调制信号vin以输出第一延时信号vo1、第二延时信号vo2、第三延时信号vo3和第四延时信号vo4，通过校正模块获取延时锁相环电路稳定后输出的四路延时信号和待调制信号vin，第四延时信号vo4与待调制信号vin之间的时延大于待调制信号vin的一个信号周期时，校正模块产生一个激励信号输出给鉴相器，使得鉴相器输出一个高电压信号给延时锁相环电路的电荷泵，以激励延时锁相环电路进入新的稳态，直至第四延时信号vo4与待调信号vin之间的时延为待调制信号vin的一个信号周期，因而可以适应不同频率的信号以及降低对延时模块的延时性能的要求，大大降低了设计难度提高了电路的可靠性。

摘要： DLL电路包括：第一延时调节电路，调节第一分频信号CK1延时量；第二延时调节电路，调节第二分频信号CK2延时量；频率合成电路，对这些延时调节电路的输出进行合频，产生内部时钟信号，并向时钟树单元中的实际路径提供第二时钟信号；时钟驱动器，接收第一延时调节电路的输出，并将该输出提供给复制路径；以及第二时钟驱动器，接收第二延时调节电路的输出。这些时钟驱动器具有实质相同的电路结构。因此，即使在电源电压波动时，对于各分频信号的影响几乎相等。因而，可以防止DLL电路因电源电压波动所致的功能退化。

摘要： 本发明公开了一种用于产生四相延时信号的方法及DLL电路，其通过延时锁相环电路通过捕获待调制信号vin以输出第一延时信号vo1、第二延时信号vo2、第三延时信号vo3和第四延时信号vo4，通过校正模块获取延时锁相环电路稳定后输出的四路延时信号和待调制信号vin，第四延时信号vo4与待调制信号vin之间的时延大于待调制信号vin的一个信号周期时，校正模块产生一个激励信号输出给鉴相器，使得鉴相器输出一个高电压信号给延时锁相环电路的电荷泵，以激励延时锁相环电路进入新的稳态，直至第四延时信号vo4与待调信号vin之间的时延为待调制信号vin的一个信号周期，因而可以适应不同频率的信号以及降低对延时模块的延时性能的要求，大大降低了设计难度提高了电路的可靠性。

摘要： DLL电路包括：第一延时调节电路，调节第一分频信号CK1延时量；第二延时调节电路，调节第二分频信号CK2延时量；频率合成电路，对这些延时调节电路的输出进行合频，产生内部时钟信号，并向时钟树单元中的实际路径提供第二时钟信号；时钟驱动器，接收第一延时调节电路的输出，并将该输出提供给复制路径；以及第二时钟驱动器，接收第二延时调节电路的输出。这些时钟驱动器具有实质相同的电路结构。因此，即使在电源电压波动时，对于各分频信号的影响几乎相等。因而，可以防止DLL电路因电源电压波动所致的功能退化。

摘要： 本发明涉及结合DLL3和CD3的双特异性抗体构建体，其包含结合到靶细胞表面上的人DLL3的第一结合结构域和结合到T细胞表面上的人CD3的第二结合结构域。此外，本发明提供了一种编码所述抗体构建体的多核苷酸、包含所述多核苷酸的载体和用所述多核苷酸或载体转化或转染的宿主细胞。此外，本发明提供了一种用于产生本发明的所述抗体构建体的方法、所述抗体构建体的医疗用途和包含所述抗体构建体的试剂盒。

摘要： 本公开文本总体上涉及能够与δ样蛋白3(DLL3)结合的免疫球蛋白相关组合物(例如抗体或其抗原结合片段)。本发明技术的抗体可用于检测和治疗有需要的受试者的DLL3相关癌症的方法中。

摘要： 本发明提供一种DLL延时链包括粗调延时块、精调延时块、固定延时块、信号控制线和开关单元，所述开关单元响应于所述通断控制信号接通设定的所述粗调输出端口、所述精调输出端口和/或所述延时输出端口；粗调延时块中设置有粗调延时链，包括共用初始端口且电路结构不同的主延时链和辅延时链。通过切换端口灵活地获取基于主延时链或辅延时链而得到的信号，能避免下溢时指令和数据的大量丢失，有利于保证CPU的数据读取数据的正确性。本发明还提供的下溢时快速锁定方法，采用本发明一方面的DLL延时链进行而具有相应优势，无须重置DLL延时链就能及时恢复正常相位锁定状态，极利于提高DRAM工作的可靠性，推动集成电路技术的深层次应用。

摘要： 本发明公开了一种抗DLL3 scFv，能够特异性结合DLL3；并给出了两套重链和轻链的互补决定区序列。本发明还公开了含有抗DLL3 scFv的抗DLL3 CAR，相关核苷酸序列的质粒、重组慢病毒载体。本发明验证了抗DLL3 CAR‑T对DLL3阳性肿瘤细胞的特异性杀伤，及其接受靶细胞刺激后的细胞因子分泌；为开发全人源DLL3抗体及后期DLL3抗体向临床发展奠定了基础。

摘要： 本申请涉及使用延迟锁定回路DLL电路系统的存取命令延迟。存储器装置可具有存储器阵列和延迟锁定回路DLL电路，所述延迟锁定回路DLL电路调整与所述存储器阵列的存取操作相关联的信号。所述存储器装置还可包含控制器，所述控制器通过经由所述DLL电路的延迟电路系统发射用以存取所述存储器阵列的存取命令来延迟所述存取命令。这可致使当从所述延迟电路系统输出时所述存取命令被延迟第一持续时间。所述存取命令的延迟可使数据信号与所述存取命令对准，使得所述存取命令和系统时钟可致使锁存所述数据信号的合适的数据。

摘要： 本文提供抗DLL3嵌合抗原受体(CAR)、DLL3结合蛋白及这种CAR或DLL3结合蛋白在治疗小细胞肺癌等DLL3相关病症中的用途。