细胞外钙离子内流上调原发性开角型青光眼患者小梁网细胞Copine1表达的研究

摘要

目的 探讨原发性开角型青光眼患者(primary open-angle glaucoma,POAG)小梁网细胞外钙离子内流对膜蛋白copinel表达的影响.方法 原代培养POAG患者小梁网细胞,应用荧光显微镜和流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度,所用钙离子荧光探针为Fluo3-AM；应用钙离子运载剂A23187增加细胞内钙离子浓度；应用Real-time PCR检测小梁网细胞内钙离子浓度增加前后copine1在转录水平的表达.结果 经免疫组织化学鉴定培养的细胞为小梁网细胞.荧光显微镜下观察与流式细胞仪定量结果均显示,应用钙离子运载剂A23187增加了POAG患者小梁网细胞内的钙离子浓度.Real-time PCR检测证实A23187的应用使copine1 mRNA在小梁网细胞中表达增加了(1.8±0.3)倍.结论 POAG患者小梁网细胞内钙离子浓度增高可引起copinel在转录水平表达的上调,copinel在小梁网细胞中的功能研究将会增加对POAG病理学机制的理解,有助于新药物靶点的开发.