枸杞多糖对体外培养视网膜神经节细胞的保护作用

摘要

目的 评价枸杞多糖对视网膜神经节细胞凋亡的保护作用.方法 体外培养大鼠视网膜神经节细胞株RGC-5,采用谷氨酸作为细胞凋亡诱导剂建立RGC-5凋亡模型,终浓度为5 mmol·L-1的谷氨酸作用24 h可造成约50％的RGC-5凋亡,用此方法作为RGC-5凋亡模型.并用不同浓度(10 mg·L-1、20 mg·L-1、40 mg·L-)枸杞多糖加入培养基干预24 h及48 h,使用四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法和AnnexinV-FITC法检测细胞存活率及凋亡率.结果 MTT法检测结果显示:枸杞多糖作用24 h后,对照组存活率为48.7％,枸杞多糖组(10 mg·L-1、20 mg·L-1、40 mg·L-1)细胞存活率分别为53.1％、59.6％、66.9％,对照组与各浓度枸杞多糖组差异均有统计学意义(均为P＜0.05);40 mg·L-1枸杞多糖组与20 mg·L-1枸杞多糖组之间差异有统计学意义(P＜0.05).枸杞多糖作用48 h,各浓度枸杞多糖组细胞存活率分别为60.5％、75.2％、88.6％,各浓度枸杞多糖组的RGC-5存活率明显高于对照组(均为P＜0.05),且40 mg·L-1枸杞多糖组RGC-5存活率最高,与20 mg·L-枸杞多糖组之间差异有统计学意义(P＜0.05).AnnexinV-FITC法检测结果显示:枸杞多糖作用24 h,对照组凋亡细胞(早期凋亡和晚期凋亡)所占比例为44％,枸杞多糖组(10 mg·L-1、20 mg·L-1、40 mg·L-1)凋亡细胞比例分别为20.6％、12.3％、8.5％,对照组与各浓度枸杞多糖组差异均有统计学意义(均为P＜0.05);枸杞多糖作用48 h时,枸杞多糖组(10 mg·L-1、20 mg·L-1、40 mg·L-)凋亡细胞比例分别为11.6％、6.2％、3.7％;24 h及48 h时,40 mg·L-1枸杞多糖组与20 mg·L-1枸杞多糖组之间凋亡细胞所占比例差异有统计学意义(P＜0.05).结论 枸杞多糖对RGC-5具有一定的保护作用,并表现出一定程度的剂量-时间依赖性.