新城疫病毒疫苗及白细胞介素-15对卵巢癌细胞株体外作用的实验研究

摘要

目的 研究新城疫病毒疫苗(ATV-NDV)和白细胞介素-15(IL-15)对人卵巢癌细胞株体外生长的作用.方法 将正常人卵巢上皮细胞和人卵巢癌细胞株3AO体外培养;分离正常人外周血淋巴细胞;制备人卵巢癌细胞株3AO ATV-NDV,(1-2)×10<'7>细胞/0.5ml;将ATV-NDV、IL-15、ATV-NDV+IL-15分别与正常人外周血淋巴细胞共培养24、48、72、96小时;用正常人外周血淋巴细胞作对照,用MTT比色法测定不同浓度ATV-NDV、IL-15作用不同时间对淋巴细胞增殖程度的影响,将ATV-NDV(50μl)、rhIL-15(50ng/ml)及ATV-NDV(50μl)+IL-15(50ng/ml)与人外周血淋巴细胞共培养48小时,按效靶比分别为50∶1、25∶1、10∶1加入正常人卵巢上皮细胞和人卵巢癌细胞株3AO,继续培养24、48、72、96小时,MTT法测定细胞生长抑制率;HE染色法观察效靶比为50∶1、继续培养24-96小时后细胞形态学变化.结果 1.淋巴细胞增殖改变:ATV-NDV、IL-15具有对淋巴细胞的增殖活性,随浓度的增加和时间的延长而增强(P<0.05),与对照组相比差异有显著性(P<0.01).IL-15与ATV-NDV具有协同作用,并且这种协同作用与IL-15、ATV-NDV的单独作用相比差异有显著性(P<0.01);IL-15、ATV-NDV对正常人外周血淋巴细胞增殖作用的影响与对照组相比差异有显著性(P<0.01);IL-15与ATV-NDV作用相比差异无显著性(P=0.35).2.ATV-NDV、IL-15对肿瘤细胞生长抑制作用:活化的淋巴细胞与靶细胞共培养可杀死肿瘤细胞,并具有时效性(P<0.05).3.细胞形态学变化:活化的淋巴细胞作用48小时后肿瘤细胞即已出现凋亡形态,作用96小时时即有坏死细胞形态出现.结论 ATV-NDV和IL-15对正常人外周血淋巴细胞增殖有影响,经ATV-NDV、IL-15及ATV-NDV+IL-15共培养的正常人外周血淋巴细胞可有效地抑制细胞株3AO生长,具有时间、浓度依赖性.