奶牛乳房炎4种常见病原菌多重PCR检测方法的建立及初步应用

摘要

为了建立同时检测引起奶牛乳房炎的主要4种致病菌(大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌和肺炎克雷伯氏菌)的多重PCR检测方法,根据参考菌株合成了4种细菌的特异性引物,优化多重PCR反应条件,并进行特异性和敏感性试验。结果显示,多重PCR试验特异性地检测了这4种病原菌;敏感性试验显示,对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌和肺炎克雷伯氏菌基因组DNA的最低检测量依次为17.11、19.16、109.6、20.89 pg/μL;临床样品检测显示,该方法对送检的35份临床奶样进行检测,阳性检出率为51.4%,比细菌分离检出率高。建立的多重PCR方法对乳房炎病原检测和临床治疗用药具有指导意义。