含PRRS病毒ORF5的伪狂犬病病毒TK基因缺失转移载体的构建

摘要

提取伪狂犬病病毒（ＰＲＶ）ＢａｒｔｈａＫ６１株基因组ＤＮＡ，用限制性内切酶ＫｐｎＩ充分消化，回收５．９ｋｂ片段（Ｊ片段），将其克隆于质粒ｐＵＣ１１９ ＫｐｎＩ位点上，获得ｐＢＫＪ。用两对针对ＰＲＶ ＴＫ基因的特异性引物对重组质粒进行ＰＣＲ鉴定，证明其中含有ＰＲＶ ＴＫ基因。然后用ＫｐｎＩ、ＰｓｔＩ和ＢａｍＨＩ等限制性内切酶对其进行酶切分析，确定了克隆片段的物理图谱。进一步研究证实ＴＫ基因位于其中的