牛病毒性腹泻病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

摘要

根据GenBank公布的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)5′端非编码区核苷酸序列,设计引物和TaqMan荧光探针,建立了BVDV的实时荧光定量PCR检测方法.建立的方法只能检测到BVDV,而与CSFV、BRV、MT及IBRV没有交叉反应,具有高度的特异性,在1010～102模板范围内具有良好的线性关系,所制作的标准曲线相关系数为 0.991,最低可检测到100个拷贝的阳性质粒.所建立的BVDV实时荧光定量PCR检测方法具有快速、特异、灵敏等特点.