禽呼肠病毒S1733株σNS单克隆抗体的制备及其特性鉴定

摘要

用体外表达的禽呼肠病毒(ARV)σ NS蛋白作为筛选抗原,筛选出σNS蛋白的特异单克隆抗体,并对制备的抗体特性进行鉴定.将纯化浓缩的禽呼肠病毒S1733毒株100 μg免疫Balb/c小鼠,取四免后3d的鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,用间接ELISA测定融合细胞分泌的抗体效价,阳性孔细胞经3次有限稀释法进行克隆,通过Western blot、Dot-ELISA、直接免疫荧光试验、病毒中和试验等方法对获得的单抗特性进行检测.经σNS蛋白筛选和克隆成功获得1株杂交瘤细胞株SB2-1 K3,该单克隆杂交瘤细胞株能稳定分泌抗禽呼肠病毒σNS蛋白的抗体,腹水抗体效价达105以上,与其他参试非禽呼肠病毒毒株没有交叉反应,具有良好的特异性；病毒中和试验证明其没有中和能力,可以用于禽呼肠病毒的特异性检测.