RACK1对硼替佐米诱导的多发性骨髓瘤细胞凋亡及MAPK/ERK通路的影响

摘要

目的:探讨蛋白激酶C受体(Receptor for activatedC kinase1,RACK1)对硼替佐米(Bortezomi,Bor)诱导的多发性骨髓瘤(Multiple myeloma,MM)细胞凋亡及MAPK/ERK通路的影响.方法:选取6例岳阳市第一人民医院收治的MM患者及6名正常体检者,用实时荧光定量PCR检测血浆及人MM细胞系中RACK1 mRNA的表达.将MM细胞分为3组:对照组(不干预)、Bor组(75nM的Bor干预12 h)和Bor+siRACK1组(RACK1 siRNA转染24 h后再行Bor干预).CCK-8法检测各组细胞中的细胞存活率,Hoechest 33342染色检测细胞凋亡,Western Blot检测MAPK/ERK通路相关蛋白表达.结果:与正常体检者相比,MM患者血浆及MM细胞系中RACK1 mRNA表达显著增加(P＜0.05).Bor作用12h、24 h和48 h可显著降低MM细胞的存活率(P＜0.05).与对照组相比,Bor组和Bor+siRACK1组细胞存活率显著降低,Bor+siRACK1组细胞存活率明显高于Bor组(P＜0.05).Hoechest 33342染色显示对照组细胞核染色均一,未见凋亡小体,Bor组见少量凋亡小体,而Bor+siRACK1组细胞见大量凋亡小体,表现为核固缩或碎块状;与对照组相比,Bor组和Bor+siRACK1组细胞中多发性骨髓瘤细胞凋亡率显著增加(P＜0.05),Bor+siRACK1组多发性骨髓瘤细胞凋亡率明显高于Bor组(P＜0.05).三组间多发性骨髓瘤细胞凋亡率对比差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组相比,Bor组和Bor+siRACK1组细胞中p-P38和p-ERK的表达显著降低,而Bor+siRACK1组p-P38和p-ERK的表达低于Bor组(P＜0.05),3组间P38和ERK的表达对比差异无统计学意义(P＞0.05).结论:RACK1沉默可增强Bor诱导的MM细胞凋亡及生长抑制,其机制可能与MAPK/ERK途径抑制有关.