人永生化角朊细胞表达干细胞表型的流式细胞术分析

摘要

目的:观察人永生化角朊细胞系HaCaT细胞表达的几种干细胞表型.为以该细胞系构建人组织工程皮肤和进行基因操作提供相应的实验依据.方法:采用无血清培养基对HaCaT细胞进行培养,获取处于对教生长期的细胞进行直接荧光双标法、直接荧光单标法和间接荧光单标法以分别CD49fCD71、角蛋白K19、CD29和CD133,依托流式细胞仪检测上述抗原在HaCaT细胞的表达情况.结果:特异性较高的角朊干细胞表型CD49f+CD71-和K19+在HaCaT细胞的百分率分别为16.6±2.8%和14.94±l.23%.CD29+HaCaT细胞为49.55+6.68%,可能包括了角朊干细胞和短暂扩增细胞.分别反映细胞黏附特性和增殖能力的CD49f+HaCaT细胞和CD71+HaCaT细胞各占98.1:± 0.8%和82.1±3.9%.HaCaT细胞仅表达3.43±0.77%的干细胞表型CD133.结论:人永生化角朊细胞系HaCaT细胞的表型特征表明它具有较高的角朊干细胞和短暂扩增细胞比例以及很强的黏附基底膜特性和增殖能力,提示它可以作为构建人组织工程皮肤种子细胞和基因修饰角朊干细胞的替代物.