组织工程皮肤

摘要： 组织工程皮肤的出现为临床上大面积皮肤缺损的治疗提供了新方法,干细胞、生长因子以及生物材料的开发为皮肤再生医学的发展提供了巨大的前景,但它们在促进创面再生、减少或抑制瘢痕形成方面还有待于进一步的优化和研究。再生疗法的疗效很大程度上受宿主免疫系统的影响,而宿主免疫细胞尤其是巨噬细胞在组织修复和再生过程中起着重要的作用。因此,了解巨噬细胞如何影响组织愈合对开发有效的再生策略至关重要。本文就巨噬细胞极化在组织工程皮肤修复中的研究做一综述。

摘要： 皮肤是人体最大的器官,也是人体抵御外部环境的第一道防线,具有保护、分泌、排泄、感觉及免疫等功能[1]。当皮肤受到高温、化学、感染和创伤等物理、化学及机械因素损伤时,人体的体表防线被破坏,环境中的微生物可侵入人体造成致命的感染,体内的水、电解质及营养物质丢失也会对人体形成严重威胁。全层皮肤损伤超过一定面积后很难通过表皮组织的增殖爬行修复创面,往往需进行自体皮肤移植,造成供皮区的损伤和痕迹。

摘要： 目的:探究组织工程皮肤治疗糖尿病足溃疡的临床效果观察.方法:选取2019年6月至2020年6月我院收治的72例糖尿病足溃疡患者,随机分为观察组及对照组各36例.观察组选择组织工程皮肤治疗,对照组选择自体皮移植治疗.比较分析手术愈合时间、VVS评分及不良反应发生率.结果:观察组的VSS评分在术后3个月和6个月时均显著低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);经不同治疗方式之,两组均未出现任何不良反应.结论:针对糖尿病足溃疡患者,采用组织工程皮肤治疗,可降低临床上不良反应的发生率,取得极佳的治疗效果,降低手术愈合时间,安全有效,改善患者的皮肤瘢痕等情况,具有临床应用价值.

摘要： 目的:研究人羊膜上皮细胞(hAECs)在去表皮真皮上构建组织工程皮肤及其性状.方法:取人表皮细胞,应用气-液界面培养法对采取细胞进行培养和分化,使其形成具有表皮结构的皮肤类似物后制成去表皮真皮组织(DED),并植入hAECs,对其在去表皮真皮上构建组织工程皮肤进行研究.结果:经研究后发现,通过器官培养hAECs能够在DED上培养出与正常人体皮肤结构相似的组织工程皮肤,同时与DED上皮肤类似物的增殖和分化标记分子的情况相似.结论:通过将hAECs植入DED中能够培养出与正常人体皮肤结构作用功能、甚至增殖及分化标记分子相似的组织工程皮肤,可将该类细胞进一步研究,有利于未来对人类皮肤缺失的修复治疗.

摘要： 目的 探索体外构建的羊膜上皮细胞-去表皮真皮组织(hAECs-DED)组织工程皮肤体外存活及修复创面情况.方法 将新鲜的组织工程全层皮肤hAECs-DED移植于裸鼠,2周后对移植的人工皮肤结构及功能进行观察.结果 构建的hAECs-DED组织工程皮肤移植于实验动物体内后能够转化为组织结构合理的皮肤组织,并可有效地修复实验动物皮肤缺损.结论 经试验构建中明显可得知,hAECs-DED的组织工程皮肤用于实验裸鼠皮肤移植实验,可以有效转化为裸鼠自身资质结构且可以基本融合于自身皮肤组织.,并可有效地修复实验动物皮肤缺损,具有良好的临床应用前景.

摘要： 目的 通过该研究找到一种可替代自体皮移植术治疗糖尿病足溃疡的新方法,提高糖尿病足溃疡愈合质量,减少愈合后瘢痕增生,防止二次复发.方法 选择2016年6月至2018年5月收治的40例糖尿病足患者,按照随机数字表法分为自体皮移植组20例和组织工程皮肤移植组20例.两组患者分别于移植术后观察创面愈合时间,术后3个月、6个月后对于植皮区皮肤瘢痕进行评价.对数据行t检验、 检验.结果 自体皮移植组术后于(15.12±3.24)天创面愈合,组织工程皮肤组术后(16.23±3.15)天创面愈合.两者差异无统计意义学上意义(P>0.05).自体皮移植组植皮区创面愈合后3个月及6个月皮肤瘢痕评分(温哥华瘢痕量表评估标准(Vancouver scar scale即VSS标准)分别为(12.32±1.36)分和(13.29±1.68)分.组织工程皮肤移植组分别为(9.32±1.54)分和(10.83±1.59)分.两者差异有统计意义学上意义(P<0.05).结论 组织工程皮肤是治疗糖尿病足创面的有效方法,在部分情况下可替代自体皮移植术治疗糖尿病足.

摘要： 组织工程皮肤的发展必须以提高自主创新能力，建设创新型企业为战略核心。从产品、技术、标准三个层次去推广组织工程皮肤的系列产品。针对目前国内外研究情况，必须加强自主知识产权的组织工程皮肤产品的研发工作，提升其对伤口的贴附性、防止细菌入侵及生长、增加弹性及延展性、渗透性、降低免疫排斥性、减轻伤口疤痕产生、缩短伤口愈合时程及减低价格，加快相关产品导技术的专利申请工作，加快组织工程化多种类型皮肤组织的研发工作并尽快实现产业化，建立和完善相应的技术标准、准入规范和伦理学等指导原则，加速我国组织工程领域的自主创新能力和再生医学水平的提升，培育和发展新兴产业。

摘要： 观察临床应用组织工程皮肤促进创面愈合的疗效.回顾性分析2015年9月-2016年3月间应用难愈创面11例,其中下肢创面伴有下肢动脉闭塞3例,糖尿病足且糖尿病10年以上5例,糖尿病10年以上且有下肢动脉闭塞3例,上述病例均是常规换药、负压治疗、植皮未成活的病例,且创面至少有6个月以上未愈;治疗基础疾病,检测并控制血糖、血压,活血药物应用,创面换药及负压间断治疗,待创面新鲜后予清创移植组织工程皮,定期换药.

摘要： 目的:组织工程皮肤是治疗皮肤缺损的有效手段,但较短的有效保存时间限制了其推广应用,本研究尝试通过加入海藻糖进行组织工程皮肤的干燥保存,建立一种新的组织工程皮肤保存方法.rn 方法:以成纤维细胞和组织工程真皮为对象,对种子细胞中稳定负载海藻糖的条件进行优化,通过MTT法、CFDA染色、透射电镜观察干燥保存细胞和组织的活性,进一步将负载海藻糖的组织工程真皮经过干燥、水化后移植于C57BL/6J小鼠背部全层皮肤缺损,观察皮肤缺损的修复效果,并与正常组织工程真皮进行比较.rn 结果:实验结果表明，成纤维细胞负载海藻糖的最佳条件为海藻糖浓度为200mM，在37°C条件下孵育8小时，CFDA染色部分细胞干燥、复水后染色为阳性，MTT结果分析显示干燥保存的细胞保持了约的30%的活性，电镜观察显明细胞膜及膜内结构在一定程度上也得到了保护。构建的负载海藻糖的组织工程真皮经过干燥、水化后，可以有效修复皮肤缺损，缺损修复速率和修复效果与正常组织工程真皮无明显差异。rn 结论:组织工程皮肤可以进行干燥保存，通过负载海藻糖后进行干燥、保存，是组织工程皮肤的一种有效保存方法。

摘要： 组织工程皮肤是应用组织工程学的方法体外再造皮肤组织。目前的研究进展主要在三个方面的探索。文章对此从种子细胞、人工真皮、人工复合皮肤这三个方面分别加以阐述，这些研究结果显示体外构建的黑素瘤组织模型能够反映黑素瘤侵袭特征，同时可以看到富含胶原成分的真皮替代物能够提供黑素瘤细胞体外生长的微环境。然而，由于种子细胞和/或真皮基质材料的不同，体外构建的皮肤及黑素瘤组织结构、成分及功能也存在一定的差异。

摘要： 目的: 探讨表皮干细胞复合羊膜构建组织工程皮肤修复糖尿病难愈创面的可行性和方法。rn 方法:分离培养SD大鼠皮肤表皮干细胞（ESCs），并用5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记。建立糖尿病SD大鼠创面模型，随机分为A、B、C三组，A组创面移植羊膜负载BrdU标记的ESCs组织工程皮肤；B组创面移植羊膜；C组为空白对照组，创面未给予干预。观察创面愈合情况、计算创面愈合率，HE及免疫组织化学SP法检测创面愈合组织中BrdU及增殖细胞核抗原（PCNA）的表达。用图像分析软件测量阳性细胞积分光密度平均值。rn 结果：与B、C组比较，A组创面愈合速度加快，创面愈合率明显增高，组间比较差异有显著统计学意义(P<0.01)。A组创面及新生表皮中可见BrdU阳性细胞，B、C组皮肤创面组织中始终未见BrdU阳性细胞。各组创面组织中可见PCNA阳性细胞表达，但A组的阳性细胞积分光密度值与B、C组比较差异显著(P<0.01)。rn 结论: 表皮干细胞复合羊膜构建组织工程皮肤可有效促进糖尿病创面愈合。

摘要： 干细胞，包括胚胎干细胞和各类成体干细胞，具有分化为人体所有体细胞的能力，被认为是组织工程的理想种子细胞。组织工程的提出与建立仅有20余年时间，但发展迅速，已成为一个国家生物医学发展水平的重要标志之一。近10年来，组织工程技术的发展经历了器官替代、细胞治疗和结构性组织构建等多个阶段。临床上在处理烧(创)伤深度缺损创面时发现，皮肤替代物促进再生的能力比促进修复更有效，理想的组织工程皮肤可达到像自体皮肤一样的金标准。目前组织工程研究进入了“再生医学”的新时代，其标志是国际组织工程学会与再生医学学会合并为统一的学术组织。rn 皮肤组织工程最终目的是要构建出一种皮肤替代物，能迅速实现完整皮肤功能的重建：具备所有皮肤附属器(毛囊、皮脂腺、汗腺等)，分层良好，并实现血管化及神经功能迅速重建，尽可能完美愈合。目前还没有一种理想的组织工程皮肤能满足临床严重皮肤缺损患者的需求，其重要原因之一是无理想的种子细胞及其合适的来源。干细胞在皮肤组织工程中的应用已取得了很大进展，但仍存在不少问题需解决，如胚胎干细胞的研究面临一系列的伦理学和社会学问题以及基因组突变、致瘤性风险等。另外，成体干细胞是一群相对混杂的细胞，且获取数量有限，取材较困难，供体有限，随年龄增长增殖能力、多向分化能力下降，且有病毒污染的可能，因而寻找其他来源的干细胞成为近年来的研究热点。rn 脐带组织间充质干细胞是存在于脐带沃顿胶和血管周围组织中的一种干细胞，具有多向分化和自我更新的潜能，其性质接近胚胎干细胞，可分化为骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞等多种细胞，并且具有免疫调节性;脐带组织来源广泛、获取方便、抗原性低、能更好地规避生物伦理学问题等更多的优势，有望成为组织工程种子细胞的新来源。也可建立脐带干细胞库，以便需要时能随时提供。这将为组织工程产品提供新的理想种子细胞及来源。我们通过分离培养鉴定脐带组织间充质干细胞，在特定的条件下将其定向诱导分化为皮肤及其重要附属器细胞，采用生物支架材料构建含汗腺等附属器的新型组织工程全层皮肤，已取得初步预期实验结果，将进行动物实验及临床试验，观察性能和疗效。rn 综上所述，干细胞研究已经成为当今生命科学中一个重要领域。rn 尤其在组织工程方面非常重要。以脐带间充质干细胞为种子细胞，辅之于良好的材料及基因工程技术。从而构建组织工程产品，相信通过不断努力与发展，最终会出现理想的组织工程皮肤等组织器官的曙光，为人类造福。

摘要： 目的:探讨人表皮干细胞和猪脱细胞真皮构建组织工程皮肤修复全层皮肤缺损的可行性.方法 将胶原Ⅳ分离扩增人表皮干细胞,以生长良好的表皮干细胞接种于制备好的异种(猪)无细胞真皮支架上,构建组织工程皮肤.将该组织工程皮肤移植于大鼠全层皮肤缺损,对移植后创面进行大体观察、组织学观察及免疫组化、免疫荧光鉴定等.结果 表皮干细胞接种于无细胞真皮后增殖良好,组织工程皮肤移植于大鼠全层皮肤缺损后创面愈合好,抗HLA-I荧光反应阳性,新生的表皮由移植的人表皮干细胞增殖形成.结论 利用体外纯化扩增的表皮干细胞及制备的猪脱细胞真皮可体外联合构建具有复层结构的组织工程皮肤,该组织工程皮肤可用于修复动物全层皮肤缺损.

摘要： 目的:结合科室组织工程和重建皮肤附属器的研究现状,深入探讨皮肤附属器重建目前的研究热点和发展趋势.rn 方法:介绍科室在组织工程皮肤中重建毛囊和汗腺等附属器的研究,包括细胞实验和动物实验结果,并查阅国内外文献,了解目前本领域的发展动态,供相关研究人员借鉴,并共同探讨未来努力方向.rn 结果:探讨皮肤附属器重建目前的研究热点和发展趋势,为相关研究人员提供借鉴.rn 结论:介绍创面愈合中皮肤附属器重建的研究和再认识.

摘要： @@“组织工程”概念提出至今已有20年。回顾20年发展进程，在种子细胞、三维支架材料、生物活性因子、组织构建、体内植入等方面已取得很大进展，展现了良好的产业化前景。组织工程是再生医学的外延，随着再生医学的发展不仅有助于加深认识人类的生长发育与老化，而且直接关系到人类的健康，已经成为当今生命科学和医学关注的焦点。再生医学涉及众多学科，但其科学问题的核心是细胞的诱导分化与调控。这种细胞的分化与调控在机体众多组织器官早期发育中的表现为上皮与间充质的相互作用，其分化、形态发生、生长是由两组织或细胞间相互作用来进行的。另外上皮与间充质或细胞间的相互作用，不仅是出现于器官发生过程中，而且在一生中对其器官的形态保持、再生以及损伤的修复起着重要作用。因而，研究器官发育与再生中的细胞的相互作用以及细胞诱导分化成为再生医学与组织工程领域的关键问题之一。

摘要： 探讨ES源表皮干细胞(ESC)与高分子材料构建人工皮肤Inspecskin的方法,为化妆品皮肤毒性检验的替代模型奠定基础。先将成纤维细胞放置于3-羟基丁酸-co-3-羟基戊酸共聚物(PHBV)真皮支架内短暂体外培养,表面再放置ESC细胞,体外培养3d,观察其形态和进行免疫组化检测。结果表明成纤维细胞与ESC细胞均在真皮支架内粘附,免疫组化表明ES源表皮样干细胞仍呈β1整合素强阳性和CK15、CK19阳性。结果提示PHBV体外构建的组织工程化皮肤内,ESC细胞仍维持未分化状态,可进一步构建全层皮肤。

摘要： 一种组织工程皮肤构建方法，包括以下步骤：(1)配制组织工程皮肤培养液，(2)制备人体成纤维细胞饲养层，(3)制备凝胶生物材料，(4)构建和培养组织工程皮肤。本发明组织工程皮肤构建方法，系采用添加经过抑制增殖处理的成纤维细胞来完成与表皮细胞的相互作用，从而提高表皮细胞的成熟和分化程度，对提高化合物体外毒性检测的精确度有着重要的作用，从而使其制备的组织工程皮肤能够更有效阻挡化合物对活性细胞的毒性作用，提高组织工程皮肤对化合物毒性的预测精确度，最终产生更多有效的基于组织工程皮肤的动物替代检测方法。

摘要： 本本发明涉及黄芪多糖用于组织工程皮肤中促进新生皮肤血管网络再生的应用。通过在胶原‑丝素蛋白‑壳聚糖工程皮肤三维支架加入黄芪多糖可以促进新生皮肤血管网络再生，提高新生皮肤修复的速度和效率，增强修复重建的生物活性，有利于新生皮肤组织的重塑，为机械损伤、体表肿瘤切除、交通事故和建筑事故等导致的大面积皮肤缺损的治疗，提供源源不断且高效的新型组织工程皮肤来源，为创伤骨科、烧伤外科和修复重建外科对大面积皮肤缺损的治疗，开辟了一种崭新的将组织工程皮肤和中医药理论相结合的途径。

摘要： 本发明公开了一种水凝胶、纳米纤维支架与皮肤细胞层层组装的血管化全层组织工程皮肤及其制备方法，属于高分子材料和生物医用材料技术领域。人工组织工程皮肤包括表皮层和真皮层，其中表皮层是位于真皮层上方的纳米纤维支架与一种种子细胞交替层叠组成。真皮层由下层纳米纤维支架、上层水凝胶支架与三种种子细胞组成，种子细胞分布在纳米纤维支架表面与水凝胶内部及表面。其通过将静电纺丝技术、高分子络合技术与纤维/细胞层‑凝胶层‑纤维/细胞层层自组装技术相结合的方法制备。该具有生物功能的人工组织工程皮肤可用于各种组织的再生和修复，特别是创伤愈合、血管新生并减少疤痕形成等。

摘要： 本发明公开了一种利用皮肤来源的祖细胞制备组织工程皮肤的方法，该方法包括以下步骤：1）分离SKPs；2)将分离得到的？SKPs移入扩增培养基中进行扩增；3)SKPs的DiI荧光染料标记；4）制备组织工程皮肤，将胶原海绵打孔器做出直径8mm圆形胶原海绵Co60照射灭菌，SKPs细胞1×105个/20-30uL培养基加于海绵糙面上，进行培养。本发明的组织工程皮肤中的SKPs可分化为平滑肌细胞、血管内皮细胞、神经组织，分化出的平滑肌细胞、血管内皮细胞可参与构成血管结构，促进创口新生血管形成，从而提高皮肤愈合速度及愈合质量。

摘要： 本发明涉及组织工程皮肤保存领域，尤其涉及一种组织工程皮肤的保存方法及组织工程皮肤。在对该组织工程皮肤进行保存时，由于所述组织工程皮肤被半包埋在琼脂溶液与基础培养液的混合液中，能够延长组织工程皮肤的保存时间。本发明实施例提供的一种组织工程皮肤的保存方法，所述组织工程皮肤具有表皮层和真皮层，包括：步骤1)将组织工程皮肤的表皮层朝上置于培养皿中；步骤2)将基础培养液与琼脂溶液的混合液注入所述培养皿中，使所述组织工程皮肤的真皮层包裹在所述混合液中，表皮层裸露在外。

摘要： 一种组织工程皮肤构建方法，包括以下步骤：(1)配制组织工程皮肤培养液(2)制备人体成纤维细胞饲养层(3)制备凝胶生物材料：(4)构建和培养组织工程皮肤。本发明组织工程皮肤构建方法，系采用添加经过抑制增殖处理的成纤维细胞来完成与表皮细胞的相互作用，从而提高表皮细胞的成熟和分化程度，对提高化合物体外毒性检测的精确度有着重要的作用，从而使其制备的组织工程皮肤能够更有效阻挡化合物对活性细胞的毒性作用，提高组织工程皮肤对化合物毒性的预测精确度，最终产生更多有效的基于组织工程皮肤的动物替代检测方法。

摘要： 本发明公开了一种骨髓间充质干细胞复合人脱细胞真皮的方法及制得的组织工程皮肤在修复皮肤缺损中的用途，属于生物技术领域。采用本发明骨髓间充质干细胞复合人脱细胞真皮的方法制备获得的骨髓间充质干细胞复合人脱细胞真皮对皮肤缺损创面具有很好的促进愈合作用，尤其是对难愈性创面，如大面积深度烧伤，烧伤残余创面，压疮，骨质、肌腱缺损，肿瘤切除术后，慢性溃疡创面等也具有一定的促进愈合的作用，具有广阔的应用前景。

摘要： 本发明公开了一种水凝胶、纳米纤维支架与皮肤细胞层层组装的血管化全层组织工程皮肤及其制备方法，属于高分子材料和生物医用材料技术领域。人工组织工程皮肤包括表皮层和真皮层，其中表皮层是位于真皮层上方的纳米纤维支架与一种种子细胞交替层叠组成。真皮层由下层纳米纤维支架、上层水凝胶支架与三种种子细胞组成，种子细胞分布在纳米纤维支架表面与水凝胶内部及表面。其通过将静电纺丝技术、高分子络合技术与纤维/细胞层‑凝胶层‑纤维/细胞层层自组装技术相结合的方法制备。该具有生物功能的人工组织工程皮肤可用于各种组织的再生和修复，特别是创伤愈合、血管新生并减少疤痕形成等。

摘要： 本本发明涉及黄芪多糖用于组织工程皮肤中促进新生皮肤血管网络再生的应用。通过在胶原‑丝素蛋白‑壳聚糖工程皮肤三维支架加入黄芪多糖可以促进新生皮肤血管网络再生，提高新生皮肤修复的速度和效率，增强修复重建的生物活性，有利于新生皮肤组织的重塑，为机械损伤、体表肿瘤切除、交通事故和建筑事故等导致的大面积皮肤缺损的治疗，提供源源不断且高效的新型组织工程皮肤来源，为创伤骨科、烧伤外科和修复重建外科对大面积皮肤缺损的治疗，开辟了一种崭新的将组织工程皮肤和中医药理论相结合的途径。

摘要： 本发明公开了一种组织工程皮肤修复裸鼠全层皮肤缺损的实验研究方法，包括以下步骤：1)取健康雄性裸鼠分为2组，分别为组织工程组和空白对照组，每组10只裸鼠；2)待裸鼠麻醉后背部正中剪成直径约为1cm的圆形缺损；3)组织工程组裸鼠缺损处用构建的hAECs‑DED组织工程皮肤覆盖创面，空白对照组不用任何东西覆盖；4)进行术后创面愈合情况观察及组织学检测；5)于术后四周在裸鼠背部术区取材，组织切片，行HE染色；6)统计学分析。本发明将构建的hAECs‑DED组织工程皮肤移植于裸鼠创面，从创面愈合率、创面愈合时间、组织病理学等方面检测和了解组织工程皮肤产品用于修复裸鼠全层皮肤缺损的效果，为将来的临床应用提供实验依据与技术支持。