抗牛血清IgG单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及鉴定

摘要

用牛血清IgG免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,用含山羊血清的培养基培养细胞,上清用间接ELISA法筛选.获得4株能稳定分泌抗牛血清IgG的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为1G5、2A8、3F5、4C5.其中2A8为IgG2a,其余3株为IgG1；腹水单抗的ELISA滴度均超过10-5;除3F5株单抗与山羊血清有交叉反应外,1G5、2A8、4C5株与人、马、猪、羊、兔、豚鼠等血清均不发生交叉反应；4株单抗与制备病毒性疫苗的基质液呈阴性反应；4株单抗识别分子量为160kD的牛血清lgG的两个不同抗原表位；4株单抗相对亲和力大小依次为4C5 ＞2A8 ＞1G5 ＞3F5,相对敏感度依次为2A8 ＞4C5 ＞3F5 ＞1G5;4株杂交瘤细胞株的染色体计数均大于90条,连续培养三个月以及冷冻保存半年后复苏,细胞生长良好.使用这些单抗建立的双抗体夹心法检测生物制品中的残留牛血清IgG.