人脐血来源的树突状细胞的体外培养扩增

摘要

目的研究人脐血来源的树突状细胞(DCs)体外培养扩增,并检测其功能.方法应用Ficoll-Hypaque离心获得界面细胞,贴壁培养2 h,获得单个核细胞,体外以重组hGM-CSF(50 ng/ml)+hIL-4(10 ng/ml)+hTNF-α(50 ng/ml)诱导培养14天.在DCs发育过程中,在光镜下观察其生长情况,应用流式细胞仪检测DCs表型.采用MTT法检测DCs活化的T细胞对肿瘤细胞的杀伤性.结果第6天体外培养的DCs由贴壁状态变为悬浮毛刺状细胞,随着培养时间的延长,此类细胞数量增多,第12天为形态不规则的毛刺状,为典型树突状细胞形态.流式细胞仪检测表明,成熟DCs高水平地表达HLA-DR、CD80、CD83、CD1a、CD11c、CD123.被激活的T细胞对2种来源于不同组织的肿瘤细胞均产生了明显的杀伤性.结论人脐血经rhGM-CSF+rhIL-4+hTNF-α体外诱导培养,能诱导出DCs.