黏虫体内两种微管蛋白基因cDNA序列的克隆与序列分析

摘要

以黏虫4龄幼虫为材料提取总RNA,利用RT-PCR和eDNA末端快速扩增技术(RACE),分别扩增得到该虫的α和β微管蛋白基因的cDNA序列各1条.其中α微管蛋白基因的cDNA序列1443个碱基,包括一个1353个碱基的开放阅读框,编码一个含450个氨基酸的蛋白,分子量约为50.0ku.氨基酸的142～148位存在一个微管蛋白标志信号片段GGGTGSG,在氨基酸序列的C-端有一个酪氨酸残基,N-端存在一个对转录后调控非常重要的保守区MRECI序列,以上特点与其他昆虫α微管蛋白氨基酸序列相同.黏虫β微管蛋白基因cDNA序列含1906个碱基,开放读码框1 344个碱基,编码氨基酸447个,分子量约为50.2ku,等电点4.751～4个氨基酸MREI为β微管蛋白转录后调控信号,140～146GGGTGSG位同样存在一个微管蛋白标志信号片段.序列比对表明,克隆的a和p微管蛋白基因与其他昆虫的α和β微管蛋白基因在核苷酸和氨基酸水平上都是高度同源的,黏虫与家蚕(Bombyxmori)a微管蛋白的氨基酸序列同源性达到99.3%,与其他3种夜蛾科昆虫α微管蛋白的氨基酸序列同源性更是达到100%.黏虫与家蚕β微管蛋白的氨基酸序列同源性达到98.7%,与烟草天蛾β微管蛋白的氨基酸序列同源性达到99.6%.两个基因的cDNA序列已经登录GenBank并获得登录号分别为EU100016和EU234504.