枸杞花药愈伤组织悬浮培养条件下胚状体发生与植株再生

摘要

采用枸杞花药进行离体培养,建立细胞系,诱导植株再生,结果在含不同激素的4种培养基上都诱导出了愈伤组织,诱导率为1.7%～16.9%.愈伤组织在MS+2,4-D 0.5 mg/L的固体培养基上,经2～3次培养后,获颗粒状胚性愈伤组织,颗粒状胚性愈伤组织转入含相同成分的液体培养基中进行振荡培养,24 h后获得大量单细胞.单细胞液经过多次继代培养,建立起稳定的悬浮系.悬浮细胞在液体培养基中培养8～10 d可获得含有大量胚状体的愈伤组织块,收集悬浮培养物转移到MS+6BA0.2 mg/L的固体培养基上,胚状体能够萌发形成大量绿色小芽,小芽转入生根培养基(MS+NAA0.2 mg/L)中20 d后得到完整植株.植株根尖细胞经细胞学鉴定为单倍体.