蛋白质电化学检测的新体系研究及应用

摘要

在pH 3.5 B-R缓冲溶液中以溴百里香酚蓝为电化学探针建立了蛋白质测定新体系。溴百里香酚蓝在-0.458 V(vs.SCE)有一个灵敏的极谱伏安还原峰,加入人血清白蛋白(HSA)后,其峰电位不变而峰电流下降。峰电流的下降值同HSA质量浓度在1.0~40.0 mg.L-1范围内呈线性关系,其回归方程为ΔI″p=133.52C-3.72,r=0.999,定量下限为1.0 mg.L-1。由试验结果求得蛋白质与溴百里香酚蓝相互作用的结合比为1∶4,结合常数βs=1.43×1019。应用于实际人血清样品的测定,结果与经典的考马斯亮蓝G-250光度法一致。此方法还可应用于牛血清白蛋白、牛血红蛋白、卵清白蛋白等的测定。