苦参毛状根的高频诱导及苦参总碱含量的测定1

摘要

为提高苦参毛状根诱导率,探索苦参总碱生产的新资源和途径。分别用不同浓度的发根农杆菌R1601转化苦参诱导毛状根,用发根农杆菌R1601侵染苦参后和不同浓度的2,4二氯苯氧乙酸(2,4-D)和6-苄氨基嘌呤(6-BA)共培养诱导毛状根,利用PCR方法检测脱菌完全的毛状根,对获得的毛状根株系继代培养,并对苦参毛状根的苦参总碱含量进行了测定。结果:发根农杆菌R1601菌液浓度在吸收值(A600)为0.8时最适合毛状根的诱导;添加0.375 mg/L的2,4-D和0.375 mg/L的6-BA时,诱导率最高,可达56.7%;PCR鉴定表明,诱导的毛状根含TL-DNA序列;毛状根株系中苦参总碱含量比2年生苦参根中苦参总碱含量略低。表明利用苦参毛状根大规模培养可以获得苦参总碱。