抗血管内皮生长因子受体2单链抗体的筛选及表达纯化

摘要

为了竞争性抑制血管内皮生长因子与血管内皮生长因子受体2的结合作用,采用噬菌体展示技术,从噬菌体抗体库中筛选得到血管内皮生长因子受体2的高亲和力抗体,再通过PCR分析,基因测序,序列比对等步骤挑选出高亲和力的抗体片段的基因序列AK404,转化至大肠杆菌HB2151中,大量发酵进行可溶性表达,将表达产物通过镍柱纯化,最后经SDS-PAGE鉴定,获得纯度为95%的电泳纯抗体,产量可以达到每升发酵液614μg。定量ELISA分析显示,AK404与受体的结合呈剂量依赖性,进一步研究开发可以用于抗血管生成抗肿瘤的治疗或肿瘤诊断。