重组可溶性血管内皮细胞生长因子受体I(sFlt-1)的分离纯化及受体拮抗剂筛选模型的初步建立

摘要

目的:从基因工程菌S.lividans[pSGLgpp-F]发酵液中分离纯化重组可溶性血管内皮细胞长因子受体I(sFlt-1),并以纯化产物初步构建了VEGFR拮抗剂的筛选模型.方法:将发酵液上清经60﹪硫酸铵沉淀、Heparin-Sepharose CL-6B亲和层析、透析、冷冻干燥等步骤进行分离纯化,用纯化的重组sFlt-1为靶位构建模型,进行VEGFR拮抗剂的筛选.结果:纯化得到的sFlt-1,SDS-PAGE显示为单一条带,MALDI-TOF-MS测得sFlt-1分子量为48.7kD,构建了拮抗剂的筛选模型.结论:利用纯化的sFlt-1初步建立了拮抗剂筛选模型,为从天然产物及组合化学库等进行大规模筛选sFlt-1拮抗剂奠定了基础.