人血管内皮细胞生长因子受体sFlt-1在婴儿双歧杆菌中的表达和鉴定

摘要

目的:构建重组质粒pET32a-sFlt-1,并将其导入婴儿双歧杆菌,为婴儿双歧杆菌介导的sFlt-1基因转运系统在体内的抗血管生成作用奠定基础.方法:将编码血管内皮细胞生长因子受体sFlt-1 胞外区1-3 loop 316个氨基酸残基的cDNA插入到pET32a构建重组表达质粒pET32a-sFlt-1,转化婴儿双歧杆菌,阳性克隆菌经质粒提取、酶切鉴定,得到两条大小分别与基因sFlt-1及pET32a质粒片段大小相符的电泳条带,RT-PCR检测到外源性sFlt-1基因已成功导入婴儿双歧杆菌.结果:经酶切鉴定质粒pET32a-sFlt-1构建成功,转化入婴儿双歧杆菌,并证实其在mRNA水平可表达.结论:成功构建重组质粒pET32a-sFlt-1成功导入婴儿双歧杆菌, 并证实其在mRNA水平可表达.