新型降钙素的制备及活性测定

摘要

新型降钙素 (一种人降钙素类似物 )基因工程菌nCT/ pGEX 2T/E .coliBL2 1经 2 0L规模发酵 ,离心收集细胞 ,反复冻融裂解细胞 ,裂解液经G Sepharose 4B亲和层析纯化得到融合蛋白。融合蛋白进行磺酸化和溴化氰裂解后 ,用S Sepharose纯化得到新型降钙素前体 ,其纯度为 97 6 %。选用羧肽酶Y(CPY)将其前体转化为C 末端酰胺化的新型降钙素 ,转化率为 34 %。转化液经HPLC分离纯化得到新型降钙素。大鼠体内降血钙试验表明新型降钙素具有显著降血钙活性。