新型降钙素的制备及活性测定

摘要

新型降钙素(一种人降钙素类似物)基因工程菌nCT/pGEX-2T/E.coliBL21经20L规模发酵,离心收集细胞,反复冻融裂解细胞,裂解液经G-Sepharose-4B亲和层析纯化得到融合蛋白.融合蛋白进行磺酸化和溴化氰裂解后,用S-Sepharose 纯化得到新型降钙素前体,其纯度为97.6%.选用羧肽酶Y(CPY)将其前体转化为C-末端酰胺化的新型降钙素,转化率为34%.转化液经HPLC分离纯化得到新型降钙素.大鼠体内降血钙试验表明新型降钙素具有显著降血钙活性.