松杉灵芝漆酶的分离纯化及酶学性质研究

摘要

采用硫酸铵分级沉淀、透析和DEAE-sepharose阴离子交换柱层析对松杉灵芝漆酶进行分离纯化并研究其部分酶学性质。结果表明,纯化漆酶比活力为55.438 7 U/mg,回收率为31.7%,相对分子质量约为52 000。该酶催化底物ABTS的最适反应温度和最适反应pH值分别为40℃和4.0,在30~40℃及pH 4.0~5.0范围内具有良好的稳定性。以ABTS为底物的米氏常数Km为0.909 mmol/L,vmax为454.5 mmol/（Lmin）。K+和Fe3+对漆酶具有明显的激活作用;NH4+、Cu2+对漆酶活性影响不大;Fe2+能完全抑制漆酶的活性。