圆斑星鲽(Verasper variegatus)wtl基因的克隆与表达分析

摘要

圆斑星鲽(Verasper variegats)雌鱼生长快,成熟雌鱼个体大小是雄鱼的2倍以上,开展性别相关基因的功能研究,对于探究圆斑星鲽性别决定机制,建立单性培育技术具有重要意义.本研究获得了wtla及wtlb两个同源基因,wtla基因全长为3263bp,预测开放阅读框(ORF)长为1245bp,编码415个氨基酸,5'-UTR和3'-UTR分别长372bp和1640bp;wtlb基因全长为2312bp,预测开放阅读框(ORF)长为1281bp,编码427个氨基酸,5'-UTR和3'-UTR分别长369bp和659bp.wtla基因编码氨基酸分子量为46.2kDa,理论等电点为9.24,无跨膜结构及信号肽,在ORF末端有4个锌指结构,编码KTS三肽;wtlb基因编码氨基酸分子量为46.95kDa,理论等电点为8.99,无跨膜结构及信号肽,在ORF末端有4个锌指结构,并且编码KTS三肽.基因表达结果表明:wtla和wtlb基因主要在圆斑星鲽性腺中表达,精巢的表达高于卵巢,肾脏的表达量显著高于其他组织,推测wt1a基因和wt1b基因在性腺和肾脏发育过程及功能方面均发挥重要作用;在早期发育阶段,wt7a基因在原肠期之前微弱表达,从原肠早期开始逐渐上升至神经胚期表达量达到最高,之后逐渐下降,直至孵化阶段,推测wtla基因在圆斑星鲽原始生殖细胞分化过程及性腺发育中发挥重要作用.