莴苣原生质体的分离方法

摘要

以莴苣无菌苗的幼叶为试材,研究了不同的分离材料、质壁分离时间、苗龄、酶液组合、酶解时间及酶液渗透压等对原生质体分离效果的影响.结果表明:幼叶在含有13 ％甘露醇的CPW溶液里质壁分离2h,获得的原生质体产量存活率均高于其它质壁分离时间；苗龄为20 d的幼叶分离得到的原生质体质量高,原生质体呈圆形、内含物多、活力强；酶液组合为1.0％纤维素酶+0.2％离析酶,25℃黑暗条件下酶解12h可获得大量有较高活力的原生质体；酶解液中添加浓度为9％的甘露醇较适合原生质体分离.