金线莲ISSR-PCR反应体系建立

摘要

利用正交设计L16 (45)对金线莲ISSR-PCR反应体系的5因素(模板DNA、Taq酶、引物、Mg2+和dNTP)在4个水平上进行优化试验,采用直观分析法获得影响因素最佳反应水平.结果表明:最终建立的金线莲ISSR-PCR的最佳反应体系为,在25μL的反应体系中,DNA模板为40 ng、Taq酶为1.60 U、引物浓度为0.80 mmol/L、dNTP浓度为0.96 mmol/L、Mg+浓度为2.40 mmol/L.该反应体系的建立为金线莲种质资源分类、遗传多样性分析提供了更客观可靠的方法.