慢病毒介导shRNA LINGO-1质粒转染促进骨髓间充质干细胞向神经细胞转化的研究

摘要

目的:探究慢病毒介导shRNA LINGO-1质粒转染促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经细胞转化的研究.方法:利用shRNA基因干扰技术,构建shRNA LINGO-1干扰载体,慢病毒转染BMSCs,根据病毒转染情况分成空白对照组(未转染慢病毒的BMSCs)、空载体病毒组(转染不含shRNA LINGO-1干扰载体慢病毒的BMSCs)、干扰载体病毒组(转染shRNA LINGO-1干扰载体慢病毒的BMSCs).利用流式细胞仪检测BMSCs的表面蛋白,利用RT-PCR和Western-Blot检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF)、巢蛋白的表达.结果:CD44和CD29在第2代BMSCs的表达为60.2%和58.3%;CD34和CD45在第2代BMSCs的表达为3.4%和2.6%.慢病毒转染效率为90%以上.空白对照组、空载体病毒组和干扰载体病毒组的GFAP、NSE、NF和巢蛋白mRNA的相对表达量比较差异有统计学意义(P0.05),干扰载体病毒组和空载体病毒组的差异有统计学意义(P0.05). There was a statistically significant difference between the interference vector virus group and the empty vector virus group (P<0.05). The protein expression level detected by Western-blot also showed the same expression characteristics. Conclusion: Lentivirus-mediated shRNA LINGO-1 interfering vector transfection promotes the transformation of BMSCs into neural cells.