血小板内皮细胞黏附分子的剪接体在胚胎干细胞血管形成过程中的表达

摘要

目的探讨血小板内皮细胞黏附分子(PECAM)-1的剪接体在胚胎干细胞分化过程中的表达规律.方法体外培养胚胎干细胞,在细胞因子的作用下形成胚胎样小体(EB);然后将EB种植到胶原中,在细胞因子的作用下诱导出芽性血管新生.分别利用免疫组织化学、流式细胞术、逆转录聚合酶链反应等方法检测胚胎干细胞及其分化过程中PECAM-1、Oct-4及胚胎阶段特异性抗原(SSEA)-1的表达.应用克隆分析的方法检测不同的PECAM-1剪接体在EB形成和出芽性血管新生过程中的表达分布.结果 PECAM-1主要表达在胚胎干细胞-细胞连结部位.随着胚胎干细胞的分化,Oct-4及SSEA-1表达下降.胚胎干细胞表达8种PECAM-1的剪接体,包括全长、Δ12、Δ14、Δ15、Δ12&14、Δ12&15、Δ14&15、Δ12&14&15, 其中Δ15和Δ14&15表达水平最高.在胚胎干细胞形成EB和出芽性血管新生过程中,剪接体表达水平发生变化,其中Δ12&14&15的表达明显上升,Δ15表达下降.结论未分化的胚胎干细胞表达PECAM-1,剪接体的表达变化可能参与了胚胎干细胞的血管形成.