万古霉素耐药肠球菌的分子特征及同源性分析

摘要

目的研究北京朝阳医院临床分离的万古霉素耐药肠球菌（VRE）的基因型及同源性。方法采用 WHONET 软件调查北京朝阳医院2003年6月至2007年3月 VRE 的发生率,收集这段时间分离的、来自不重复患者的38株 VRE,采用含6 mg/L 万古霉素筛选平皿确定 VRE。多重 PCR 及序列分析确定糖肽类耐药基因的基因型,脉冲场凝胶电泳（PFGE）确定耐药株的亲缘关系。结果VRE 较多出现在重症监护病房（34.2%,13/38）。2003至2007年,VRE 的分离率如下:2003年2.6%（5/190）,2004年1.8%（6/340）,2005年0.7%（2/271）,2006年6.8%（20/294）,2007年1至3月3.3%（5/153）。38株 VRE 中,PCR 和序列分析证明15株为 vanB 基因型,均为粪肠球菌,万古霉素最低抑菌浓度（MIC）在16～48 mg/L,替考拉宁 MIC 在0.4～0.5 mg/L;23株为 vanA 基因型,均为屎肠球菌,万古霉素MIC≥256 mg/L（除 E31为32 mg/L）,替考拉宁 MIC 在2～32 mg/L。23株 vanA 基因型屎肠球菌中有12株表现为 vanA 基因型、vanB 表型。PFGE 共分为10型,15株粪肠球菌中有14株均来自同一克隆（B 型）,1株分型未明;23株屎肠球菌中21株分为9型,主要是 A、D、E、F 型,2株分型未明。结论北京朝阳医院流行的 VRE 主要有 vanA、vanB 两种基因型。vanA 基因型屎肠球为多克隆传播,vanB 基因型粪肠球为单克隆传播。部分 vanA 基因型屎肠球存在基因型与表型不一致现象。