熊去氧胆酸下调Bax及半胱氨酸蛋白酶-3表达抑制骨髓间充质干细胞来源肝细胞凋亡

摘要

目的应用骨髓间充质干细胞诱导来源肝细胞研究熊去氧胆酸（UDCA）在肝细胞凋亡过程中的作用机制。方法体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为成熟肝细胞,应用去氧胆酸（DCA）诱导细胞凋亡（DCA组）,UDCA干预（D+U组）,并设置非凋亡组（Cont组）和UDCA单独作用组（UDCA组）。凋亡细胞采用Hoechst染色和半胱氨酸蛋白酶（Caspase-3）活性检测,半定量RT-PCR及Realtime RT-PCR检测p53及Bax tuRNA表达,免疫组化方法检测Bax蛋白表达。结果与Cont组比较,DCA组肝细胞凋亡的数量及半胱氨酸蛋白酶3活性都明显增加（P＜0.05）,而在D+U组则被抑制（P＜0.05）。半定量RT-PCR及Realtime RT-PCR结果发现,p53及Bax mRNA的表达在DCA组中明显上调（P＜0.05）,此上调可被UDCA抑制（P＜0.05）。DCA诱导的Bax阳性细胞数量增加亦可被UDCA抑制。结论 UDCA通过下调p53/Bax信号分子表达而抑制DCA诱导的肝细胞凋亡。