血管紧张素1-7对博来霉素诱导大鼠肺纤维化的抑制作用

摘要

目的探讨血管紧张素（Ang）1-7对博来霉素诱导大鼠肺纤维化的抑制作用。方法 18只Wister雄性大鼠按随机数字表法随机分为对照组、博来霉素组和博来霉素+Ang1-7组。均以微量泵0.29μl/h皮下24 h恒速持续泵注4周,具体为:博来霉素组以博来霉素气管内滴入并泵内注入注射用水,博来霉素+Ang1-7组以博来霉素气管内滴入并泵内注入Ang1-7(25μg·kg-1·h-1),对照组以生理盐水气管内滴入并泵内注入注射用水。4周后HE、Masson染色评价纤维化程度,测定羟脯氨酸含量,Western印迹法分析检测Ⅰ型胶原蛋白,实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测转化生长因子（TGF）-β及α-Ⅰ型胶原mRNA含量。培养人胚肺成纤维细胞（HFL-1）,设置无刺激对照组、AngⅡ刺激组(10-7mol/L的AngⅡ刺激)、Ang1-7刺激组(10-7mol/L的Ang 1-7刺激)、AngⅡ+Ang1-7刺激组（上述浓度的Ang1-7和AngⅡ刺激）、AngⅡ+Ang1-7+A779刺激组(10-6mol/L的A779干预1 h后予上述浓度Ang1-7和AngⅡ刺激)。利用QuantiGene多基因定量检测下游因子TGF-β1、RT-PCR检测α-Ⅰ型胶原mRNA表达情况。结果体内实验:与对照组比较,博来霉素组纤维化程度增高,组织中羟脯氨酸的含量明显增多[（3.69±0.18）比（0.50±0.15）mg/g,P＜0.05];博来霉素+Ang1-7组纤维化程度减轻,羟脯氨酸含量[（2.14±0.29）mg/g]明显减少（P＜0.05）;博来霉素组TGF-β1 mRNA、α-I型胶原mRNA和α-Ⅰ型胶原蛋白相对表达量分别为4.45±0.45、5.14±0.55和1.48±0.34,均高于对照组的1.00±0.20、1.00±0.08和0.23±0.11（均P＜0.05）;而博来霉素+Ang1-7组上述表达量（2.80±0.35、3.10±0.52和0.49±0.11）均低于博来霉素组（均P＜0.05）。体外实验:AngⅡ刺激组TGF-β1mRNA和α-Ⅰ型胶原mRNA的相对表达量（1.67±0.26和4.86±1.36）均高于无刺激对照组（1.00±0.10和1.46±0.54）（均P＜0.05）;而Ang1-7刺激组上述表达量（1.30±0.22和2.07±1.05）与无刺激对照组差异均无统计学意义（均P＞0.05）;AngⅡ+Ang1-7刺激组上述表达量（0.91±0.30和1.57±0.27）均低于AngⅡ刺激组（均P＜0.05）;AngⅡ+Ang1-7+A-779刺激组上述表达量（1.25±0.14和1.29±0.49）与AngⅡ+Ang1-7刺激组差异均无统计学意义（均P＞0.05）。结论 Ang 1-7对博来霉素所致的肺纤维化具有抑制作用,该作用可能与Ang 1-7抑制AngⅡ诱导TGF-β1的表达有关。