Siah1对大鼠低氧性肺动脉高压发病的调控机制

摘要

目的探讨Siah1对大鼠低氧性肺动脉高压（HPH）发病的调控机制。方法 40只成年雄性Wistar大鼠按随机数字表法随机分为对照组和低氧3、7、14、21 d组, 每组8只, 常压间断低氧复制HPH大鼠模型, 对照组大鼠常氧下饲养。测各组大鼠平均肺动脉压（mPAP）、右室肥厚指数（RVHI）、管壁面积与血管总面积比值（WA%）、管腔面积与血管总面积比值（LA%）;原位杂交检测肺内低氧诱导因子1α （HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）mRNA相对表达量, 免疫组化检测其蛋白质相对表达量;原位杂交、逆转录-PCR检测肺内低氧诱导因子抑制因子（FIH）、Siah1 mRNA相对表达量, 免疫组化、Western印迹法检测其蛋白质相对表达量。结果低氧7 d组mPAP、WA%、LA%显著高于对照组[（21.3±1.6）mmHg比（15.9±1.3）mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）、（41.4±2.8）%比（35.0±2.2）%、（58.6±2.8）%比（65.0±2.2）%, 均P＆0.05], 低氧14 d组达高水平并维持。低氧14 d组RVHI显著高于对照组[（27.0±1.8）%比（23.2±2.1）%, P＆0.05]。低氧14 d组HIF-1α mRNA相对表达量显著高于对照组[（0.188±0.014）比（0.150±0.014）, P＆0.05];低氧3 d组HIF-1α蛋白相对表达量显著高于对照组（0.186±0.014比0.067±0.008, P＆0.05）。低氧7 d组VEGF mRNA、蛋白相对表达量显著高于对照组（0.152±0.019比0.057±0.007、0.176±0.017比0.083±0.010, 均P＆0.05）。FIH mRNA表达在低氧后无显著变化, 低氧7 d组FIH蛋白相对表达量显著低于对照组（0.166±0.015比0.200±0.017, P＆0.05）。低氧7 d组Siah1 mRNA、蛋白表达均显著高于对照组（0.144±0.014比0.067±0.010、0.136±0.017比0.084±0.019, 均P＆0.05）。HIF-1α蛋白与VEGF mRNA、VEGF蛋白表达均呈正相关（r=0.545、0.523, 均P＆0.01）;FIH蛋白与VEGF mRNA、VEGF蛋白表达均呈负相关（r=-0.785、-0.788, 均P＆0.01）; Siah1 mRNA与Siah1蛋白表达呈正相关（r=0.823, P＆0.01）;Siah1蛋白与FIH蛋白表达呈负相关（r=-0.671, P＆0.01）。结论慢性低氧诱导肺小动脉壁Siah1表达增加, 进而可能降低FIH蛋白水平, 减弱FIH对HIF-1α转录活性的抑制, 导致VEGF等HIF-1α靶基因转录激活, 从而参与HPH发生发展。