重型再生障碍性贫血细胞毒性T细胞免疫攻击靶点的体外实验

摘要

目的对重型再生障碍性贫血（SAA）患者细胞毒性T细胞所攻击的靶细胞以及各系、各阶段骨髓造血细胞的凋亡配体表达进行研究,为明确SAA免疫攻击的靶点提供依据。方法选取2011年3月至2012年3月天津医科大学总医院血液科收治的SAA患者15例,以15份正常骨髓标本作为对照,应用流式细胞术（FCM）检测骨髓CD34+、CD14+、CD33+、GlycoA+细胞凋亡相关因子（Fas）蛋白的表达量。免疫磁珠分选SAA患者骨髓中CD8+T细胞和对照骨髓中去除CD3+细胞的骨髓单个核细胞（靶细胞）,并进行共培养,FCM分析CD34+、CD14+、CD33+、GlycoA+细胞群凋亡率。结果 SAA患者骨髓CD34+细胞Fas蛋白的表达量（46.59%±27.60%）明显高于对照骨髓（8.89%±7.28%,P＜0.01）;SAA患者骨髓CD14+、CD33+、GlycoA+细胞Fas蛋白的表达量（29.29%±9.23%、46.88%±14.30%、15.15%±9.26%）明显低于对照骨髓（51.25%±38.36%、72.06%±39.88%、50.38%±39.88%,均P＜0.05）。体外实验中,实验组（SAA患者骨髓CD8+T细胞与对照骨髓CD3-细胞混合培养组）的CD34+、CD33+、CD14+细胞凋亡率（55.43%±20.50%、38.13%±20.10%、61.87%±21.65%）均明显高于对照组（对照骨髓CD8+T细胞与对照骨髓CD3-细胞混合培养组）（35.02%±13.95%、23.44%±10.33%、37.04%±22.41%,均P＜0.05）。结论 SAA细胞毒性T细胞对正常的骨髓造血干/祖、粒系、单核系细胞均具有杀伤作用。Fas/Fas配体系统介导的细胞凋亡在SAA免疫发病中发挥了重要作用。同时CD34+细胞Fas表达明显增加,可能是SAA免疫损伤的主要靶细胞。