共聚焦显微镜观测阿霉素致心肌细胞钙超载及脂联素的保护研究

摘要

目的 探讨阿霉素(ADR)对心肌细胞损伤中钙超载的机制及脂联素的保护作用.方法 采用胰蛋白酶消化法原代培养乳鼠心室肌细胞.选用培养72h的单层心肌细胞,实验分为正常对照组、单纯ADR组、ADR+APN(3μg/ml)组、ADR+APN(10μg/ml)组、ADR+APN(20μg/ml)组、ADR+APN(30μg/ml)组.实验终止后,在倒置相差显微镜下观察心肌细胞形态的变化,测定乳酸脱氢酶(LDH)的释放及肌酸激酶(CK)的活性,通过流式细胞术来检测心肌细胞的凋亡,激光共聚焦检测细胞内钙离子荧光强度.结果 与对照组相比.给予ADR后,细胞凋亡率显著增加(70.20±3.73vs4.73±1.21,p<0.05),乳酸脱氢酶(LDH)的活性及CK的活性增加(p<0.05),钙离子荧光强度明显增加(605.99±45.62vs137.17±37.7,p<0.05),APN预处理后给予ADR,可较大程度地逆转上述指标变化,与ADR组相比均具有显著性差异(p<0.05),并且呈现一定的浓度依赖性.结论 脂联素对阿霉素中毒心肌细胞具有保护作用,其机制可能与保护心肌细胞内质网有关.