双抗体夹心免疫-PCR检测弓形虫循环抗原的实验研究

摘要

目的探索弓形虫病的病原学检测方法.方法用游离的亲合素将生物素化的二抗和生物素化的腺病毒六邻体基因重组质粒DNA偶联起来,通过PCR扩增标记的DNA检测弓形虫循环抗原,建立了免疫-PCR检测方法;用该方法和ELISA法平行检测感染鼠的血清,对比研究两者敏感性及循环抗原的检出时间.结果免疫-PCR法检测弓形虫循环抗原阳性血清的最大稀释度为1:2 560,ELISA法为1:10;免疫-PCR法在感染后第2天检测到循环抗原,ELISA法在第4天检测到循环抗原.结论免疫-PCR是一种特异性高、敏感性强的弓形虫循环抗原的检测方法,可作为弓形虫病病原学的诊断方法.