基于酶联适配体快速检测食品中葡萄球菌肠毒素A

摘要

该研究基于双适配体夹心原理,建立了一种酶联适配体检测葡萄球菌肠毒素A(Staphylococcal enterotoxin A,SEA)的新方法,并对适配体浓度、链霉亲和素-辣根过氧化物酶浓度、反应体系、封闭条件、反应时间等条件进行了优化。结果显示,在适配体浓度40 nmol/L、牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,BSA)封闭浓度为1%、封闭时间4 h、反应体系为SEA适配体筛选缓冲液、链霉亲和素-辣根过氧化物酶稀释体积比1:40000、靶标与适配体反应时间30 min等优化条件下,SEA在5~500 ng/mL浓度范围内呈良好线性(R=0.996),方法检出限为0.18 ng/mL,加标回收率为91.22%~101.30%,批内和批间相对标准偏差为2.82%~7.50%。将建立的方法应用于食品样品中SEA检测,并与国标法(GB 4789.10-2016)对比验证,两种方法的检测结果具有高的相关性(R=0.994)。以上结果表明本方法具有高的灵敏度、准确性和特异性性,该研究为食品中SEA检测提供一种简便、经济、高通量的快速检测新技术。