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酶联免疫磁分离及化学发光检测系统在金黄色葡萄球菌肠毒素检测中的应用

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本研究第一次将磁分离酶联免疫测定法(Magneticaffinityimmunoassay,MAIA)和酶联免疫化学发光测定法(Chemiluminescenceimmunoassay,CLIA)检测系统引入金黄色葡萄球菌肠毒素(staphylococcalenterotoxins,SE)检测。试验中采用异硫氰酸荧光素(FITC)和碱性磷酸酶(AP)分别标记识别不同表位的两种抗SEC1单克隆抗体(mAb),用抗FITCmAb包被免疫磁珠,建立了检测SEC1的MAIA法。在此基础上将显色底物更换为发光底物(lumigenAPS-5),建立了检测SEC1的磁分离酶联免疫化学发光法。采用两种方法均实现了对SEC1的定量检测,检测样品用量30μl,检测时间1h左右,检测范围0.2-400μg/L,批内CV小于3%,批间CV小于5%。较ELISA法标本用量少、检测用时少,而且灵敏度明显提高。用于对不同基质中SEC1检测,回收率在90%~110%之间。为临床、食品工业以及未来反生物战剂可疑生物毒素污染标本的检测提供了一种理想的方法。

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