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LncRNA OSER1-AS1靶向miR-433-3p对结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响

     

摘要

目的 探讨OSER1-AS1对结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响及作用机制.方法 培养人正常结直肠黏膜细胞系FHC和结直肠癌细胞系SW480、DLD-1和HCT116,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中OSER1-AS1和miR-433-3p表达水平.以SW480细胞为研究对象,通过转染OSER1-AS1小干扰RNA或miR-433-3p模拟物(mimics)构建沉默OSER1-AS1或过表达miR-433-3p的SW480细胞,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,蛋白印迹(Western blot)检测细胞中细胞周期蛋白D1(CyclinD1)和活化的半胱天冬酶-3(Cleaved-caspase-3)蛋白水平.双荧光素酶报告基因实验验证OSER1-AS1和miR-433-3p调控关系.结果 与FHC细胞比较,结直肠癌细胞系SW480、DLD-1和HCT116中OSER1-AS1水平显著升高(P<0.05),miR-433-3p水平显著降低(P<0.05).沉默OSER1-AS1或过表达miR-433-3p表达均可降低SW480细胞存活率和CyclinD1蛋白表达水平(P<0.05),提高SW480细胞凋亡率和Cleaved-caspase-3蛋白表达水平(P<0.05).OSER1-AS1靶向负调控miR-433-3p表达.沉默miR-433-3p可逆转沉默OSER1-AS1对SW480细胞存活率、凋亡率及CyclinD1和Cleaved-caspase-3蛋白表达的影响.结论 沉默OSER1-AS1可抑制结直肠癌细胞增殖并诱导细胞凋亡,其可能通过上调细胞中miR-433-3p表达发挥作用.

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