人Tinagl1基因抑制宫颈癌细胞生长与迁移

摘要

目的 构建带pXJ-40-Myc标签的人肾小管间质性肾炎抗原样蛋白1(Tinagl1)真核表达载体,表达pXJ-40-Myc-Tinagl1融合蛋白,检测其对人宫颈癌细胞生长的影响.方法 以人卵巢文库为模板,采用PCR技术扩增Tinagl1编码区序列,双酶切后将其插入pXJ-40-Myc载体中,构建pXJ-40-Myc重组质粒;将重组质粒与空载体分别转染人宫颈癌HeLa细胞,Western印迹鉴定目的基因表达,CCK-8法、克隆形成实验测定其对宫颈癌HeLa细胞生长的影响,划痕实验检测Tinagl1对HeLa细胞运动迁移能力的影响.结果 双酶切鉴定表明,pXJ-40-Myc-Tinagl1真核表达质粒构建成功;转染HeLa细胞后融合蛋白表达,生长曲线、克隆形成及划痕实验结果表明,Tinagl1可抑制宫颈癌细胞的增殖和迁移.结论 携带pXJ-40-Myc标签的人Tinagl1基因真核表达载体能在人宫颈癌HeLa细胞中表达,且能抑制该细胞的生长.该实验为进一步研究Tinagl1在肿瘤,尤其是妇科恶性肿瘤中的功能奠定了基础.