去泛素化酶OTUD6A基因敲除小鼠的构建及表型初步分析

摘要

目的 建立去泛素化酶OTUD6A基因敲除小鼠模型,并对该模型进行初步表型分析.方法 基于CRIS-PR/Cas9基因编辑技术构建OTUD6A基因敲除小鼠;利用PCR、qPCR和Western blot技术(WB)分别在DNA水平、mRNA水平和蛋白水平上检测OTUD6A基因的表达;统计雄性OTUD6A纯合敲除(OTUD6A-/-)小鼠和雌性OTUD6A杂合子(OTUD6A+/-)小鼠交配所得后代各基因型小鼠比例及生长发育情况,对小鼠各组织器官利用苏木素-伊红染色(HE染色)进行病理学分析.结果 成功建立OTUD6A基因敲除小鼠模型,该基因敲除小鼠可正常生长繁殖并符合伴性遗传定律.与同窝野生型(WT)小鼠相比,纯合敲除(OTUD6A-/-)小鼠在体型和体质量上无显著差异,主要组织脏器也无明显的病理学异常.结论 成功构建OTUD6A基因敲除小鼠模型.纯合敲除(OTUD6A-/-)小鼠可正常生长发育,与WT小鼠相比无显著差异.