结核分枝杆菌ESAT-6＋CFP-10融合抗原克隆表达及其生物学活性

摘要

目的克隆表达结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,Mtb）融合抗原ESAT-6＋CFP-10（EC）,评价融合抗原EC刺激THP-1细胞培养上清中特定细胞因子分泌水平的变化。方法构建融合抗原EC原核表达载体,用纯化后的不同浓度融合抗原EC（10,20μg/ml）刺激THP-1细胞,分别收集刺激12和24 h细胞培养上清,采用Bio-Plex ProTMAssays细胞因子测定试剂盒检测细胞培养上清中IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、GM-CSF、TNF-α和IFN-γ的分泌水平。结果成功克隆表达此菌EC融合抗原;经过融合抗原EC刺激THP-1细胞培养上清中IL-6、IL-8和TNF-α的分泌水平明显升高,差异具有统计学意义（P〈0.05）,其余细胞因子的分泌水平在刺激前后没有显著变化。结论克隆表达的融合抗原EC具有生物学活性,能使THP-1细胞分泌的IL-6、IL-8及TNF-α水平升高。