不同免疫表位抗Mam-A单克隆抗体用于原位乳腺癌诊断的实验研究

摘要

目的基于表位特异性抗体免疫组化染色探讨乳腺珠蛋白A（mammaglobin A,Mam-A）表达或免疫活性在乳腺组织与乳腺癌组织之间的差异,并探讨这种差异用于区分正常乳腺组织与原位乳腺癌的可行性与诊断效能。方法筛选针对Mam-A不同免疫表位的单克隆抗体,分别用于正常乳腺组织与乳腺癌组织的免疫组化染色;以平均光密度值作为指标,通过计算机辅助的光密度值识别定量分析免疫组化染色特征,筛选在两种组织之间染色特征差异较为显著的表位特异性抗体,进一步对筛选的表位特异性抗体用于原位乳腺癌诊断的可行性与效能进行评价。结果筛选获得4株抗Mam-A表位特异性单抗m Ab1152、m Ab11617、m Ab995与m Ab656。分别对正常乳腺组织与原位乳腺癌组织的连续切片在相同条件下进行免疫组化染色显示,m Ab1152、m Ab11617与m Ab995平均染色光密度值在两种组织之间差异较为显著;ROC曲线分析显示,基于m Ab1152、m Ab11617与m Ab995的曲线下面积均〉0.5,其中m Ab11617优于m Ab1152和m Ab995;在各自最佳工作点下,m Ab11617诊断效能最优,特异性90%,灵敏度59.62%;进一步分析显示,m Ab11617与m Ab995联合用于原位乳腺癌诊断的灵敏度达81.48%,特异性达90%,具有明显的诊断意义。结论 Mam-A蛋白表达或免疫活性在乳腺组织与乳腺癌组织之间存在明显差异,这种差异可通过表位特异性的抗体染色与计算机辅助技术进行一定程度识别,具有重要诊断价值。