D2-43病毒E蛋白在酵母细胞表面的展示

摘要

目的:在酵母细胞表面展示登革2型病毒43株(D2-43)的E基因,探索利用酵母表面展示系统建立DNA改组筛选平台的可行性.方法:通过RT-PCR扩增获得D2-43的E基因,将该基因亚克隆至T载体后,再克隆至酵母表面展示载体pYD1,于酿酒酵母EBY100中利用半乳糖进行诱导表达.表达产物采用间接免疫荧光法和FACS进行检测.结果:酵母表面展示产物可与D2-43的腹水抗体特异性地结合;在半乳糖诱导后24 h,展示E蛋白的酵母细胞百分数达22.07%.结论:本研究为建立基于酵母表面展示系统的DNA改组筛选平台奠定了基础.