下调自噬相关蛋白ATG4B抑制贝氏柯克斯体细胞内增殖

摘要

目的 研究宿主细胞自噬相关基因4B（ATG4B）对贝氏柯克斯体胞内生长繁殖的影响。方法 用ATG4B特异小干扰RNA（siRNA）处理宿主细胞（THP-1和Vero），以非特异siRNA和无siRNA处理的细胞为对照；逆转录实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和Western印迹检测抑制效果；Western印迹分析细胞自噬标识蛋白（p62和LC3）的量变；qRT-PCR检测贝氏柯克斯体感染细胞中细菌增殖水平；共聚焦显微镜观察贝氏柯克斯体感染细胞中细菌寄生囊泡发育状况。结果 与对照组比较，ATG4B特异siRNA处理组的细胞自噬标识蛋白p62和LC3-Ⅱ明显增多，细菌繁殖量更低，细菌寄生囊泡为散在分布小囊泡而不是单一成熟大囊泡。结论 宿主细胞ATG4B表达下调可部分阻断自噬，自噬的部分阻断使贝氏柯克斯体寄生囊泡发育受阻，进而抑制贝氏柯克斯体胞内生长繁殖，为阐明宿主细胞的自噬促进贝氏柯克斯体繁殖的致病机制提供了新的依据。