野油菜黄单胞菌NK—01编码生物合成多糖基因的克隆

摘要

采用甲基磺酸乙酯诱变野油菜黄单胞菌ＮＫ－０１得到多糖合成缺陷的不产粘突变株。经ＳａｌⅠ部分酶切得到的野生型ＮＫ－０１染色体ＤＮＡ片段，连接到广泛寄主载体ｐＲＫ２９３上，在Ｅ．ｃｏｌｉ中建立完整的ＮＫ－０１基因文库。通过使一株不产多糖突变株在协助质粒ｐＲＫ２０１３存在下，分别与含基因文库的Ｅ．ｃｏｌｉ菌落群体进行三亲结合转移筛选具有卡那霉素抗性的产粘接合后体，对接合后体进行的重组质粒的酶切分析表明，