光滑球拟酵母金属硫蛋白基因的亚克隆和表达研究

摘要

用ＢａｍＨＩ和ＰｓｔＩ双酶切质粒ｐＭＴⅡａ－９１ｓ获得光滑球拟酵母金属硫蛋白基因（ＭＴⅡａ）片段，并其亚克隆到Ｍ１３载体，扩增并回收ＭＴＩＩａ基因片段，经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交验证插入片段正确后，分别将ＭＴＩＩａ基因片段插入到大肠杆菌表达载体ｐＢＶ２２０和大肠杆菌－酵母菌穿梭载体ＴＩｐ３５２中，转化大肠杆菌ＤＨ５α，使其对ＣｕＳＯ４的抗性提高０．７ｍｏｌ／Ｌ左右，转化酿酒酵母受体菌ＹＳ５９，使ＹＳ５